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[发明专利]增强转运蛋白基因的表达以提高盐霉素发酵水平的方法-CN202111293718.0有效
发明人： 白林泉;刘先 -专利权人：上海交通大学
申请日： 2021-11-03 - 公布日： 2023-06-06 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种增强转运蛋白基因的表达以提高盐霉素发酵水平的方法；包括在白色链霉菌BK 3‑25中，分别过量表达内源转运蛋白基因SLNHY_0929、SLNHY_1893、SLNHY_3363、SLNHY_4037、SLNHY_0199、SLNHY_0818、SLNHY_6316和SLNHY_6652，得到高产盐霉素的突变株。本发明通过增强转运蛋白基因的转录水平，提高盐霉素的外排效率、降低其胞内毒性、解除相关合成酶的反馈抑制，最终可明显提高盐霉素产量。
增强转运蛋白基因表达提高霉素发酵水平方法

[发明专利]高活性苯丙素类衍生物的定向设计及其生物合成方法-CN202011372774.9有效
发明人：康前进;胡晓婧;欧一新;白林泉 -专利权人：上海交通大学
申请日： 2020-11-30 - 公布日： 2023-05-26 - 主分类号： G16C20/50 文献下载
摘要：本发明公开了一种高活性苯丙素类衍生物的定向设计及其生物合成方法。该设计方法利用氨基肉桂酸作为苯丙素类化合物的合成前体，并利用计算机辅助设计对所获得衍生物与靶蛋白进行对接来评价其生物活性高低。本发明主要涉及三个高活性苯丙素类衍生物，氨基双去甲氧基姜黄素(C19H18N2O2)、氨基白藜芦醇(C14H13NO2)及氨基柚皮素(C15H13NO4)，结构分别为：本发明构建了可生产该类衍生物的大肠杆菌工程菌，并进行发酵及分离纯化。本发明中所采用的设计策略为天然产物的定向设计及生物合成提供了借鉴。
活性苯丙素类衍生物定向设计及其生物合成方法

[发明专利]敲低转肽酶基因以提高谷氨酰胺转氨酶产量的方法-CN202310012023.3在审
发明人： 白林泉;吴邦昊;步国建 -专利权人：上海交通大学
申请日： 2023-01-05 - 公布日： 2023-05-23 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种敲低转肽酶基因以提高谷氨酰胺转氨酶(TG酶)产量的方法，是通过在茂源链霉菌IPIO中，利用CRISPRi/dCas9技术弱化茂源链霉菌IPIO中转肽酶编码基因的转录水平，得到高产TG酶的突变株WBH21。本发明通过降低转肽酶编码基因SMDS_318的转录水平，抑制了细胞壁的合成以促进物质运输，提高TG酶分泌效率，以此来提高TG酶的产量。本发明所得的工程菌株WBH21的TG酶发酵产量在实验室摇瓶水平下较对照菌株提高了54％。通过本发明可显著提高TG酶的发酵产量，同时使发酵成本大幅度降低。
敲低转肽酶基因提高谷氨酰胺转氨酶产量方法

[发明专利]增强表达糖苷水解酶编码基因APASM_6114转录水平以提高安丝菌素产量的方法-CN202211301760.7在审
发明人： 白林泉;阿依土热克·艾力 -专利权人：上海交通大学
申请日： 2022-10-24 - 公布日： 2023-05-23 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种增强表达糖苷水解酶编码基因APASM_6114转录水平以提高安丝菌素产量的方法。具体来说，通过在珍贵束丝放线菌ATCC 31280中利用强启动子kasOp*增强表达珍贵束丝放线菌内源性糖苷水解酶编码基因APASM_6114，促进珍贵束丝放线菌的蔗糖消耗、提高碳源利用率，最终可明显提高安丝菌素产量。最终安丝菌素产量在实验室摇瓶发酵水平下达到63.7mg/L，较对照菌株提高36.9％。通过本发明可显著提高安丝菌素的发酵产量，同时实现发酵成本的降低。
增强表达糖苷水解编码基因 apasm_6114 转录水平提高菌素产量方法

[发明专利]一种在白色链霉菌中高效合成默诺霉素A的方法-CN202011374492.2有效
发明人：康前进;李兴;白林泉;欧一新 -专利权人：上海交通大学
申请日： 2020-11-30 - 公布日： 2023-01-10 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种在白色链霉菌中高效合成默诺霉素A的方法；是基于默诺霉素A生物合成基因簇异源表达宿主Streptomyces.albus导入定点突变型A类青霉素结合蛋白基因优化其异源宿主的方法，默诺霉素A通过作用于细菌细胞壁aPBP的肽聚糖糖基转移酶结构域活性位点，来高效抑制革兰氏阳性细菌细胞壁的合成。通过基因工程的手段对默诺霉素生物合成基因簇进行大片段组装和启动子优化，在优化菌株II中导入默诺霉素A抗性基因MaPBP进一步提高菌株II默诺霉素耐受性。最终在菌株LX03中默诺霉素A异源表达产量相比出发菌株I提高了110％。本发明不仅阐述了大片段基因簇的基因工程改造方法，同时也开启了抗性基因优化Streptomyces.albus宿主来提高目标化合物产量的先河。
一种白色霉菌高效合成霉素方法

[发明专利]抑制非必需高丰度蛋白表达以提高TG酶发酵水平的方法-CN202210265587.3在审
发明人： 白林泉;吴邦昊;王丹;步建国 -专利权人：上海交通大学;泰兴市东圣生物科技有限公司
申请日： 2022-03-17 - 公布日： 2022-09-09 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种抑制非必需高丰度蛋白表达以提高TG酶发酵水平的方法，是通过在茂源链霉菌IPIO中，利用CRISPRi技术弱化茂源链霉菌IPIO中非必需高丰度蛋白编码基因的转录水平，得到高产谷氨酰胺转氨酶的突变株。本发明通过降低高丰度蛋白编码基因SMDS_5177、SMDS_758、SMDS_5989和SMDS_6427的转录水平，抑制了这些蛋白的合成，减轻TG酶合成过程中的氨基酸前体竞争压力，以此来提高谷氨酰胺转氨酶的发酵水平。本发明所得的工程菌株的谷氨酰胺转氨酶发酵产量在实验室摇瓶水平下较对照菌株分别提高37％、35％、46％和32％。通过本发明可显著提高谷氨酰胺转氨酶的发酵产量，同时大幅度降低发酵成本。
抑制必需高丰度蛋白表达提高 tg 发酵水平方法

[发明专利]增强正调控蛋白基因表达以提高阿卡波糖发酵水平的方法-CN202011564968.9有效
发明人： 白林泉;汪雪梅 -专利权人：上海交通大学
申请日： 2020-12-25 - 公布日： 2022-08-26 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种增强正调控蛋白基因表达以提高阿卡波糖发酵水平的方法。通过在游动放线菌中，利用强启动子kasOp*分别强化表达正调控蛋白基因ACPL_1889、ACPL_4236、ACPL_7303、ACPL_6479和ACPL_8104，得到阿卡波糖高产突变菌株。增强正调控蛋白基因的表达，可以促进阿卡波糖生物合成基因的表达，最终明显提高阿卡波糖产量。与出发菌株相比，本发明所得到的高产菌株发酵产量分别提高了25％、18％、26％、22％、15％，实验室摇瓶发酵水平分别达到3.29g/L、3.11g/L、3.32g/L、3.21g/L、3.03g/L。
增强调控蛋白基因表达提高阿卡波糖发酵水平方法

[发明专利]增强Subtilisin基因转录水平以提高TG酶发酵水平的方法-CN202110251651.8有效
发明人： 白林泉;王丹;张晓健 -专利权人：上海交通大学;上海东之汇生物科技有限公司;泰兴市东圣生物科技有限公司
申请日： 2021-03-08 - 公布日： 2022-08-26 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种增强Subtilisin基因转录水平以提高TG酶发酵水平的方法，是通过在茂源链霉菌中，利用人工强启动子kasOp*过量表达内源Subtilisin编码基因，促进了谷氨酰胺转氨酶酶原的活化成熟，使谷氨酰胺转氨酶的发酵产量得以提高。本发明通过增强Subtilisin编码基因的转录水平，促进了谷氨酰胺转氨酶酶原的活化成熟，以此来提高谷氨酰胺转氨酶的发酵水平，最终谷氨酰胺转氨酶发酵产量在实验室摇瓶水平下较对照菌株提高22％。通过本发明可显著提高谷氨酰胺转氨酶的发酵产量，同时使发酵成大幅降低。
增强 subtilisin 基因转录水平提高 tg 发酵方法

[发明专利]一种敲除负调控蛋白基因以提高阿卡波糖发酵水平的方法-CN202011564851.0有效
发明人： 白林泉;汪雪梅 -专利权人：上海交通大学
申请日： 2020-12-25 - 公布日： 2022-08-09 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种敲除负调控基因以提高阿卡波糖发酵水平的方法。采用本发明方法，通过在游动放线菌中，分别敲除负调控蛋白基因ACPL_5445和ACPL_3989，得到阿卡波糖高产突变菌株。通过本发明敲除负调控蛋白基因，可以促进阿卡波糖生物合成基因的表达，最终明显提高阿卡波糖产量。与出发菌株相比，本发明所得的高产菌株发酵产量分别提高了13％和8％，实验室摇瓶发酵水平分别达到3.62g/L和3.47g/L。
一种调控蛋白基因提高阿卡波糖发酵水平方法

[发明专利]增强正调控蛋白基因表达以提高井冈霉素发酵水平的方法-CN202110250673.2有效
发明人： 白林泉;俞钰典 -专利权人：上海交通大学
申请日： 2021-03-08 - 公布日： 2022-07-26 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种增强正调控蛋白基因表达以提高井冈霉素发酵水平的方法。通过在吸水链霉菌中，利用强启动子kasOp*分别增强表达正调控蛋白基因SHJG_1109、SHJG_1617、SHJG_5241和SHJG_6272，得到井冈霉素高产突变菌株。增强正调控蛋白基因的表达，可以促进井冈霉素生物合成基因的表达，最终明显提高井冈霉素产量。与出发菌株相比，本发明所得到的高产菌株发酵产量分别提高了56％、18％、55％、8％，实验室摇瓶发酵水平分别达到6.69g/L、5.05g/L、6.64g/L、4.64g/L。
增强调控蛋白基因表达提高霉素发酵水平方法

[发明专利]氨基双去甲氧基姜黄素高产菌株构建及其发酵优化方法-CN202011374464.0有效
发明人：康前进;胡晓婧;欧一新;白林泉 -专利权人：上海交通大学
申请日： 2020-11-30 - 公布日： 2022-07-26 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明涉及氨基双去甲氧基姜黄素高产菌株构建及其发酵优化方法。本发明公开了一株以对氨基肉桂酸为底物合成氨基双去甲氧基姜黄素的大肠杆菌工程菌株，属于合成生物学或者代谢工程领域。本发明将4‑香豆酰辅酶A连接酶基因4cl、二聚酮合酶基因dcs、姜黄素合成酶基因curs3以及乙酰辅酶A羧化酶基因accBC和dtsR1组成合成途径转入大肠杆菌MG1655(DE3)中，并对合成途径进行模块划分及优化，得到了产量最优的一株工程菌。通过对发酵条件的优化，最终使得该菌株在以对氨基肉桂酸为底物发酵48h后，氨基双去甲氧基姜黄素的产量达到33mg/L。本发明为高活性氨基双去甲氧基姜黄素的工业化生产和应用奠定了基础。
氨基双去甲氧基姜黄高产菌株构建及其发酵优化方法

[发明专利]一种增强1-磷酸果糖激酶基因转录水平的谷氨酰胺转氨酶高产菌株及其制备与发酵方法-CN202011567728.4在审
发明人：步国建;武立清;白林泉 -专利权人：江苏东汇生物科技有限公司
申请日： 2020-12-25 - 公布日： 2022-07-01 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种提升谷氨酰胺转氨酶产量的方法，通过增强1‑磷酸果糖激酶(1‑phosphofructokinase)基因SMDS_3792的转录水平，进而提高谷氨酰胺转氨酶产量。通过在茂原链霉菌C2中，利用人工强启动子kasOp*过量表达内源1‑phosphofructokinase基因SMDS_3792，得到高产谷氨酰胺转氨酶的突变株TGS104，通过增强1‑phosphofructokinase基因SMDS_3792的转录水平，明显提高谷氨酰胺转氨酶产量。
一种增强磷酸果糖激酶基因转录水平谷氨酰胺转氨酶高产菌株及其制备发酵方法

[发明专利]一种增强vgbS基因转录水平的谷氨酰胺转氨酶高产菌株及其制备与发酵方法-CN202011567740.5在审
发明人：步国建;武立清;白林泉 -专利权人：江苏东汇生物科技有限公司
申请日： 2020-12-25 - 公布日： 2022-07-01 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种提升谷氨酰胺转氨酶产量的方法，通过增强vgbS基因的转录水平，从分子水平上提高微生物发酵过程中的溶氧水平，促进谷氨酰胺转氨酶酶原的分泌，进而提升谷氨酰胺转氨酶产量的方法。通过在茂原链霉菌IPIE中，利用TGase的启动子TGasep*过量表达vgbS基因，得到高产谷氨酰胺转氨酶的突变株TGS105。增强vgbS基因的转录水平可以有效提高微生物发酵过程中的溶氧水平、有利于谷氨酰胺转氨酶酶原的分泌，最终可明显提高谷氨酰胺转氨酶产量。
一种增强 vgbs 基因转录水平谷氨酰胺转氨酶高产菌株及其制备发酵方法

[发明专利]一种利用卡那霉素高效筛选高产谷氨酰胺转氨酶生产菌株的方法及应用-CN202011565693.0在审
发明人：步国建;步绪亮;白林泉 -专利权人：江苏东汇生物科技有限公司
申请日： 2020-12-25 - 公布日： 2022-07-01 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明提出一种利用卡那霉素高效筛选高产谷氨酰胺转氨酶生产菌株的方法，通过在茂原链霉菌IPIO中，利用谷氨酰胺转氨酶基因的启动子控制抗性基因neo的表达，获得诱变的出发菌种IPIO‑BXL1；通过提高固体培养基中抗生素浓度进行筛选诱变后的突变菌株，从而获得高产谷氨酰胺转氨酶生产菌株。本发明还提出了一种出发菌株IPIO‑BXL1及其构建方法。本发明显著提高筛选获得高产谷氨酰胺转氨酶菌株的效率，大为节省筛选菌株的人力物力，具有广泛产业化应用前景。
一种利用卡那霉素高效筛选高产谷氨酰胺转氨酶生产菌株方法应用

[发明专利]增强VOC family protein基因的表达提高谷氨酰胺转氨酶产量的方法-CN202011565695.X在审
发明人：步国建;武立清;白林泉 -专利权人：泰兴市东圣生物科技有限公司;江苏东汇生物科技有限公司
申请日： 2020-12-25 - 公布日： 2022-07-01 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种提升谷氨酰胺转氨酶产量的方法，通过增强VOC family protein基因SMDS_2194的转录水平，进而提高谷氨酰胺转氨酶产量的方法。通过在茂原链霉菌C2中，利用人工强启动子kasOp*过量表达内源VOC family protein基因SMDS_2194，得到高产谷氨酰胺转氨酶的突变株TGS102。增强VOC family protein基因SMDS_2194的转录水平可明显提高谷氨酰胺转氨酶产量。本发明所得的工程菌株TGS102的谷氨酰胺转氨酶发酵终产量在实验室摇瓶水平下较对照菌株提高105.48％。
增强 voc family protein 基因表达提高谷氨酰胺转氨酶产量方法

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