[发明专利]一种抗非洲猪瘟病毒p54蛋白单克隆抗体的制备方法及应用在审
申请号: | 202110647535.8 | 申请日: | 2021-06-09 |
公开(公告)号: | CN113402601A | 公开(公告)日: | 2021-09-17 |
发明(设计)人: | 张改平;王爱萍;刘红亮;陈玉梅;梁超;朱习芳;马红芳;庞伟晟 | 申请(专利权)人: | 河南中泽生物工程有限公司 |
主分类号: | C07K16/08 | 分类号: | C07K16/08;C12N5/20;G01N33/569;G01N33/577 |
代理公司: | 深圳紫晴专利代理事务所(普通合伙) 44646 | 代理人: | 郭清秀 |
地址: | 450000 河南省郑*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | 一种抗非洲猪瘟病毒p54蛋白单克隆抗体的制备方法及应用,p54‑H22细胞作为免疫原和p54‑293T细胞作为检测原,所述的p54‑H22细胞用的实验物为雌性Balb/c小鼠,所述的雌性Balb/c小鼠三免一周后采用IPMA方法测定,融合后的细胞的培养基与p54‑293T细胞做IPMA检测筛选阳性杂交瘤细胞株,经三次亚克隆后获得了10株能够稳定分泌抗ASFV p54蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,用p54‑H22细胞的雌性Balb/c小鼠制备单抗。采用以上结构后,本发明具有如下优点:1、本实验中,用全细胞免疫小鼠,小鼠的IPMA效价达到较高水平,筛选到的抗体特异性高,杂交瘤筛选效果也较明显;2、小鼠血清IPMA效价可达1:25600,细胞融合后,最终通过IPMA法筛选出10株单克隆抗体,多株单克隆抗体使得实验数据更加准确可靠。 | ||
搜索关键词: | 一种 非洲 猪瘟 病毒 p54 蛋白 单克隆抗体 制备 方法 应用 | ||
【主权项】:
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