[发明专利]胞外酶催化合成鼠李糖脂的方法有效
| 申请号： | 202110466767.3 | 申请日： | 2021-04-28 |
| 公开（公告）号： | CN113249419B | 公开（公告）日： | 2023-10-27 |
| 发明（设计）人： | 徐安明;张晓晓;董维亮;周杰;姜岷 | 申请（专利权）人： | 南京工业大学 |
| 主分类号： | C12P19/44 | 分类号： | C12P19/44;C12P19/18;C12R1/385 |
| 代理公司： | 江苏致邦律师事务所 32230 | 代理人： | 徐蓓;尹妍 |
| 地址： | 211816 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 暂无信息 | 说明书： | 暂无信息 |
| 摘要： | 本发明公开了胞外酶催化合成鼠李糖脂的方法，利用鼠李糖基转移酶RhlB在胞外催化鼠李糖脂前体dTDP‑L‑鼠李糖和HAAs合成鼠李糖脂。其中dTDP‑L‑鼠李糖和HAAs基于基因改造菌株生产，其中一株菌可合成dTDP‑L‑rhamnose但不能合成HAAs，另外一株菌只能合成HAAs不能合成dTDP‑L‑rhamnose。将这两株菌合成的鼠李糖脂前体进行混合后，可在胞外利用鼠李糖脂合成酶RhlB在胞外催化前体dTDP‑L‑rhamnose和HAAs间连接合成鼠李糖脂。本发明的方法在实施过程中仅需短暂摇匀混合，可以解决鼠李糖脂发酵过程中大量起泡的问题，在鼠李糖脂生物合成领域具有广泛的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 胞外酶 催化 合成 糖脂 方法 | ||
【主权项】：
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- 2022-09-28 - 2023-03-21 - C12P19/44
- 本发明公开了一种高产鼠李糖脂的微生物发酵工艺，该工艺采用较高接种量的方式使菌体快速度过迟缓期，迅速进入稳定期生产鼠李糖脂；并结合低温发酵的方式延长鼠李糖脂合成周期，使菌体稳定期维持在11～16天，优化后的发酵工艺使得鼠李糖脂发酵产量相比初始发酵工艺提高了49.8倍，达到19.32g/L；为进一步提高鼠李糖脂的产量，本发明采用了基因工程改造策略，即：在铜绿假单胞菌中同时过表达前体dTDP‑L‑鼠李糖合成基因rmlABCD和鼠李糖脂合成基因rhlABRI，该策略使得鼠李糖脂发酵产量进一步提升为野生型的1.5倍，达到28.47g/L，产物得率Y
- 一种利用铜绿假单胞菌发酵产生鼠李糖酯的发酵工艺-202211390886.6
- 张强;张莎莎;邱媛媛;史鲁秋;薛虹宇;苏桂珍 - 南京盛德生物科技研究院有限公司;南京华狮新材料有限公司
- 2022-11-07 - 2023-03-14 - C12P19/44
- 本发明公开了一种利用铜绿假单胞菌发酵产生鼠李糖酯的发酵工艺，所述发酵工艺包括以下步骤：S1：将产鼠李糖酯菌涂布到LB平板培养基上进行培养，得到LB平板菌；S2：将上述LB平板菌挑取单菌落到LB摇瓶种子培养基上进行培养，得到LB摇瓶种子菌；S3：将上述LB摇瓶种子菌转接到摇瓶种子培养基上进行再次扩大培养；S4：将得到的种子再转接到发酵培养基中进行培养得到终产物；在发酵培养进行时，在周期6小时开始用磷酸控制其pH在7.80‑7.85，经过4‑5h后，pH开始下降，采用氢氧化钠溶液进行控制其pH7.10‑7.15；在周期15h开始补油，按照每小时补入0.08‑0.09％，周期65h，停止补油，在周期68‑72h时放罐。本发明通过控制pH，使菌体活力得到提高，进而使发酵产物产量提高。
- 柚皮苷合成三叶苷的方法-202211555170.7
- 王振东;刘传滨;陈良;崔立军;王岳;刘梦迪;于慧桢 - 山东奔月生物科技股份有限公司
- 2022-12-06 - 2023-01-10 - C12P19/44
- 本发明属于三叶苷制备技术领域，具体涉及一种柚皮苷合成三叶苷的方法。包括以下步骤：将柚皮苷溶解与氢氧化钠溶液中；依次加入金属催化剂，进行加氢；加氢反应后，过滤；得到柚皮苷二氢查耳酮；柚皮苷二氢查耳酮反向滴加，与鼠李糖苷酶液反应；调节溶液pH得到三叶苷。本合成工艺通过以柚皮苷二氢查耳酮为底物，再通过料液反向滴加与鼠李糖苷酶作用，使柚皮苷二氢查耳酮中的鼠李糖脱除，得到三叶苷，合成线路独特且更易于实际生产应用；采用柚皮苷为原料，原料来源广泛；采用巧妙的生物合成工艺具有生产成本低、收率高、绿色环保和纯度高的特点。
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