[发明专利]一种耐糖高分泌型基因工程受体菌的构建方法在审

专利信息
申请号: 202011366366.2 申请日: 2020-11-29
公开(公告)号: CN112442510A 公开(公告)日: 2021-03-05
发明(设计)人: 应明;王迎香;曹林峰;毕美营;陈美廷 申请(专利权)人: 天津理工大学
主分类号: C12N15/75 分类号: C12N15/75;C12N15/55;C12R1/07
代理公司: 天津耀达律师事务所 12223 代理人: 侯力
地址: 300384 *** 国省代码: 天津;12
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摘要: 一种耐糖高分泌型基因工程受体菌的构建方法。包括:a选择受CCR抑制的目的基因,如ackA、ycgE、ptsH、budA、acsA、xylA与sucC等,确定其cre box的位点及碱基序列;b设计一组与cre box共有序列目标片段相似性为30~100%的gRNA,确保能实现多个目标cre box片段的编辑;c构建含有CRISPR/Cas9基因座和gRNA的整合型质粒,并转入芽孢杆菌,实现对基因组多个cre box位点的编辑。采用本发明提出的基因改造方法,能同时解除多个基因的CCR阻遏效应,从而增加细菌的次级代谢产物,能够得到一种高分泌型基因工程受体菌。CCR效应的解除,提高了该工程菌的葡萄糖耐受性,使其具有较强的细胞分泌能力,能够作为微生物发酵的受体细胞。
搜索关键词: 一种 耐糖高 分泌 基因工程 受体 构建 方法
【主权项】:
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