[发明专利]一种无需裂解细胞的蛋白提取方法在审
申请号: | 202011094821.8 | 申请日: | 2020-10-13 |
公开(公告)号: | CN112143748A | 公开(公告)日: | 2020-12-29 |
发明(设计)人: | 查健;刘志强;吴瑕;龚国利;孙润聪 | 申请(专利权)人: | 陕西科技大学 |
主分类号: | C12N15/62 | 分类号: | C12N15/62;C12N15/70;C12N1/21;C12N9/50;C12R1/19 |
代理公司: | 西安通大专利代理有限责任公司 61200 | 代理人: | 马贵香 |
地址: | 710021*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | 本发明提供一种无需裂解细胞的蛋白提取方法,包括:将穿膜肽CPP基因与细菌裂解酶T4L基因通过柔性连接肽基因联合,形成融合酶CPP‑T4L基因,并连接到融合酶表达载体中,再将融合酶表达载体转入表达菌株中,得到重组宿主菌株;将目标蛋白表达基因克隆到目标蛋白表达载体上,得到目的蛋白表达载体,再将其转化至重组宿主菌株中,构建重组表达菌株;在重组表达菌株的表达体系中,先诱导目标蛋白的表达;目标蛋白表达完成后,添加IPTG启动融合酶的表达,释放目标蛋白;过滤除去细胞残渣后,收集细胞裂解上清液,回收目标蛋白。本发明省去了传统表达方法中细胞回收及破碎的步骤,极大简化了操作流程。 | ||
搜索关键词: | 一种 无需 裂解 细胞 蛋白 提取 方法 | ||
【主权项】:
暂无信息
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