[发明专利]一种烟草生物碱合成负向调控基因NtARF6的克隆和应用在审

专利信息
申请号: 202010097920.5 申请日: 2020-02-17
公开(公告)号: CN111118031A 公开(公告)日: 2020-05-08
发明(设计)人: 李文正;隋学艺;胡梦阳;王丙武;宋中邦;高玉龙;李梅云;赵璐;袁诚;张洪博;师君丽;李永平;孔光辉;曾建敏;邹聪明;刘勇;黄昌军;吴兴富 申请(专利权)人: 云南省烟草农业科学研究院
主分类号: C12N15/29 分类号: C12N15/29;C12N15/10;C12N15/82;C07K14/415;A01H4/00;A01H5/00;A01H6/82
代理公司: 昆明今威专利商标代理有限公司 53115 代理人: 欧阳桥
地址: 650000 云*** 国省代码: 云南;53
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摘要: 发明公开了烟草生物碱合成负向调控基因NtARF6及其克隆方法与应用,烟碱合成负向调控基因NtARF6核苷酸序列如SEQ ID:NO:1所示,编码的氨基酸序列如SEQ ID:NO:2所示。本发明还公开了烟碱合成负向调控基因NtARF6的克隆方法,具体步骤包括:A、确定NtARF6基因序列;B、提取烟草RNA,反转录得到第一链cDNA;C、根据NtARF6基因序列设计合成特异性引物,以cDNA作为模板,进行PCR扩增;D、回收和纯化PCR产物;E、构建了含NtARF6基因的过表达载体。将过表达载体通过农杆菌介导的转化在烟草中过表达,制备转基因植株。获得的转基因植株尼古丁含量平均下降36.2%;降烟碱含量平均下降50.5%;假木贼碱含量平均下降44.9%;新烟碱含量平均下降60.2%。说明烟草NtARF6基因在培育低烟草生物碱含量的烟草品种方面具有较大的应用前景。
搜索关键词: 一种 烟草 生物碱 合成 调控 基因 ntarf6 克隆 应用
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