[发明专利]一种同时检测A、B、C三组轮状病毒的方法在审
| 申请号： | 201911112786.5 | 申请日： | 2019-11-14 |
| 公开（公告）号： | CN110714097A | 公开（公告）日： | 2020-01-21 |
| 发明（设计）人： | 靖相密;张通;刘奕;邓雪萍 | 申请（专利权）人： | 山东凯景生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司： | 37218 济南泉城专利商标事务所 | 代理人： | 张贵宾 |
| 地址： | 250000 山东省济南市高新区综合保税区*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种同时检测A、B、C三组轮状病毒的方法，属于生物检测领域。本发明方法针对A组轮状病毒、B组轮状病毒、C组轮状病毒的靶基因各设计一对特异性引物和一条带有不同荧光标记的特异性探针，同时设计一对通用引物，PCR扩增时先采用带有通用引物标签的特异性引物进行富集扩增；然后采用通用引物标签进行指数扩增，采集指数扩增产物的荧光信号进行检测。本发明方法可同时检测A组轮状病毒、B轮状病毒、C组轮状病毒，该方法特异性强，灵敏度高，检测耗时短，可用于轮状病毒感染的早期快速诊断和轮状病毒的流行病学研究。 | ||
| 搜索关键词： | 组轮 通用引物 病毒 检测 特异性引物 轮状病毒 扩增 标签 轮状病毒感染 生物检测领域 特异性探针 快速诊断 扩增产物 流行病学 特异性强 荧光标记 荧光信号 靶基因 灵敏度 富集 可用 耗时 采集 研究 | ||
【主权项】：
1.一种同时检测A、B、C三组轮状病毒的方法，其特征在于：针对A组轮状病毒、B组轮状病毒、C组轮状病毒的靶基因各设计一对特异性引物和一条带有不同荧光标记的特异性探针，同时设计一对通用引物，PCR扩增时先采用带有通用引物标签的特异性引物进行富集扩增；然后采用通用引物标签进行指数扩增，采集指数扩增产物的荧光信号进行检测；/n其中，A组轮状病毒的特异性引物及带有荧光标记的特异性探针序列为：/n上游引物：5’-ACTTTATTGGCGAATGTTAC-3’/n下游引物：5’-GCTTCTGATAGAGGCTACTG-3’/n探针：5’-VIC-CTATACCAGTTGGACCAGTATTTCCACC-BHQ1-3’；/nB组轮状病毒的特异性引物及带有荧光标记的特异性探针序列为：/n上游引物：5’-ATAGGTATGACTGGTGGAAAT-3’/n下游引物：5’-ATGTGGGAATGTAGACGATGT-3’/n探针：5’-FAM-CGATGTTAATTATTCCACAAGTGC-BHQ3-3’；/nC组轮状病毒的特异性引物及带有荧光标记的特异性探针序列为：/n上游引物：5’-AATTTGGAAGCGTCATGGGTTTA-3’/n下游引物：5’-AAGCGTTGCGTATTGTTTGGT-3’/n探针：5’-CY5-ACAACAAGTAATACTTGTCAAATTGCAGC-BHQ2-3’；/nA组轮状病毒、B轮状病毒、C组轮状病毒的通用引物均为：/n上游引物：5’-Gatccaatcgcgtacttgc-3’/n下游引物：5’-Tgccatgcataaccgcagt-3’。/n
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