[发明专利]一种多重可视化核酸检测方法在审
| 申请号： | 201910774016.0 | 申请日： | 2019-08-21 |
| 公开（公告）号： | CN110577984A | 公开（公告）日： | 2019-12-17 |
| 发明（设计）人： | 汤从利;李松;何农跃;陈柱 | 申请（专利权）人： | 南京艾瑞谱生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6844 | 分类号： | C12Q1/6844 |
| 代理公司： | 32346 江苏瑞途律师事务所 | 代理人： | 陈彬 |
| 地址： | 210038 江苏省南京市南京经*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明属于基因检测领域，公开了一种多重可视化核酸检测方法，包括以下步骤：1)针对不同的目标核酸分子分别设计对应的锁式探针序列和通用引物序列，所述锁式探针序列中含有基因特异性序列和通用引物识别序列；2)将待检测溶液中加入锁式探针，同时加入连接酶和反应缓冲液，在同一反应体系中进行链接反应；3)将链接反应产物分配至不同的反应管中，所述反应管中分别含有与锁式探针上通用引物识别序列配对的通用引物，在反应管中进行超支化滚环扩增反应，得到扩增产物；4)可视化反应：加入微纳米颗粒，根据是否发生团聚作用观察检测结果。本发明的方法检测成本低廉，操作步骤简单，灵敏度高，能够实现多种核酸的高通量检测。 | ||
| 搜索关键词： | 锁式探针 通用引物 反应管 链接反应 可视化 目标核酸分子 通用引物序列 反应缓冲液 高通量检测 特异性序列 微纳米颗粒 产物分配 滚环扩增 含有基因 核酸检测 基因检测 检测结果 扩增产物 团聚作用 灵敏度 超支化 连接酶 检测 核酸 配对 观察 | ||
【主权项】：
1.一种多重可视化核酸检测方法，其特征在于：包括以下步骤：/n1)针对不同的目标核酸分子分别设计对应的锁式探针序列和通用引物序列，所述锁式探针序列中含有基因特异性序列和通用引物识别序列；/n2)多重锁式探针链接反应：向待检测核酸溶液中加入所述锁式探针序列，同时加入连接酶和反应缓冲液，在同一反应体系中进行链接反应，得到链接反应产物；/n3)超支化滚环扩增反应：将步骤2)中得到的链接反应产物分配至不同的反应管中，所述反应管中分别含有对应的所述通用引物序列，在反应管中进行超支化滚环扩增反应，得到扩增产物；/n4)可视化反应：向步骤3)反应后溶液中加入微纳米颗粒，根据是否发生团聚作用观察检测结果。/n
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