[发明专利]一种诱导人诱导性多能干细胞分化为内皮祖细胞的方法有效
申请号: | 201910681219.5 | 申请日: | 2019-07-25 |
公开(公告)号: | CN110438065B | 公开(公告)日: | 2020-06-05 |
发明(设计)人: | 向秋玲;陈海璇;张圳;张弛 | 申请(专利权)人: | 中山大学 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071 |
代理公司: | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人: | 颜希文;宋静娜 |
地址: | 510275 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种诱导人诱导性多能干细胞分化为内皮祖细胞的方法,包括如下步骤:1)人诱导性多能干细胞在mTeSR1培养基中维持培养,以80~90%的密度在基质胶包覆的六孔板种板,mTeSR1培养液中加入Y27632;2)种板24hr后开始诱导分化,诱导分化之初在培养液中加入DMEM/F12培养基;3)分化第2天抽吸培养基,加入DMEM/F12培养基,然后每天更换DMEM/F12培养基来维持细胞,在分化第0~2天,3~5天或5~8天加入重组蛋白GREM1,然后检测细胞表面标志物,即得CD34+和CD31+内皮祖细胞。采用本发明的诱导人诱导性多能干细胞分化为内皮祖细胞的方法能够高效地获得CD34+和CD31+双阳性的内皮祖细胞,效率高达22.4~34.7%。 | ||
搜索关键词: | 一种 诱导 诱导性 多能 干细胞 化为 内皮 细胞 方法 | ||
【主权项】:
1.一种诱导人诱导性多能干细胞分化为内皮祖细胞的方法,包括如下步骤:1)人诱导性多能干细胞在mTeSR1培养基中维持培养,以80~90%的密度在基质胶包覆的六孔板种板,mTeSR1培养液中加入Y27632;2)种板24hr后开始诱导分化,诱导分化之初在培养液中加入DMEM/F12培养基;3)分化第2天抽吸培养基,加入DMEM/F12培养基,然后每天更换DMEM/F12培养基来维持细胞,在分化第0~2天,3~5天或5~8天加入重组蛋白GREM1,然后检测细胞表面标志物,即得CD34+和CD31+内皮祖细胞。
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