[发明专利]一种肿瘤特异性T细胞的分离培养方法及由其获得的产品在审
申请号: | 201910420697.0 | 申请日: | 2019-05-20 |
公开(公告)号: | CN110452870A | 公开(公告)日: | 2019-11-15 |
发明(设计)人: | 李铁鹏;高全立;王瑶 | 申请(专利权)人: | 河南省肿瘤医院 |
主分类号: | C12N5/0783 | 分类号: | C12N5/0783 |
代理公司: | 11332 北京品源专利代理有限公司 | 代理人: | 巩克栋<国际申请>=<国际公布>=<进入 |
地址: | 450008*** | 国省代码: | 河南;41 |
权利要求书: | 查看更多 | 说明书: | 查看更多 |
摘要: | 本发明涉及一种肿瘤特异性T细胞的分离培养方法及由其获得的产品,所述分离培养方法为:首先对肿瘤患者的外周血进行预处理,再分离外周血中的单个核细胞,然后分离PD‑1阳性的单个核细胞,最后对PD‑1阳性的单个核细胞进行扩增,得到所述肿瘤特异性T细胞。本发明所涉及的分离培养肿瘤特异性T细胞的方法初始材料为肿瘤患者的外周血,无需使用患者的肿瘤组织或恶性胸腹水作为材料,取材更便捷,几乎所有的肿瘤患者均可方便采血,且无较大创伤;最终获得的T细胞肿瘤特异性高,且同时包含有CD4阳性和CD8阳性的T细胞;该方法的操作流程简单、所需时间较短。 | ||
搜索关键词: | 单个核细胞 肿瘤特异性 分离培养 外周血 肿瘤 预处理 恶性胸腹水 操作流程 肿瘤组织 采血 扩增 取材 创伤 | ||
【主权项】:
1.一种肿瘤特异性T细胞的分离培养方法,其特征在于,所述分离培养方法为:首先对肿瘤患者的外周血进行预处理,再分离外周血中的单个核细胞,然后分离PD-1阳性的单个核细胞,最后对PD-1阳性的单个核细胞进行扩增,得到所述肿瘤特异性T细胞。/n
下载完整专利技术内容需要扣除积分,VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于河南省肿瘤医院,未经河南省肿瘤医院许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服】
本文链接:http://www.vipzhuanli.com/patent/201910420697.0/,转载请声明来源钻瓜专利网。
- 同类专利
- 一种生物反应器及其搅拌桨和使用其培养NK细胞的方法-201610141694.X
- 王一飞;陈海佳;葛啸虎;曾维杰 - 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司
- 2016-03-11 - 2020-02-07 - C12N5/0783
- 本发明公开了一种生物反应器及其搅拌桨和使用其培养NK细胞的方法。所述搅拌桨外包裹有减小剪切力的材料,所述生物反应器含有其外包裹减小剪切力材料的搅拌桨,使用该生物反应器培养NK细胞。本发明使用生物反应器培养NK细胞,在搅拌桨外包裹可以减小剪切力的材料,可以降低细胞受到的剪切力伤害,有利于细胞大量扩增。本发明培养过程中不停的搅拌,为动态系统,有利于细胞进行气体交换和为细胞提供均一的培养环境,有利于细胞大量扩增。本发明方法不仅可以大量扩增NK细胞,而且所得NK细胞表面抗原表达量较高,对肿瘤细胞的杀伤活性较强。
- 一种体外富集CD8+*T细胞的方法-201810441992.X
- 高山 - 高山
- 2018-05-10 - 2020-02-07 - C12N5/0783
- 本发明属于细胞培养领域,具体涉及一种体外培养T细胞的方法,该方法可以提高CD8+T细胞:CD4+T细胞比率并且/或者提高
- 一种CIK淋巴细胞的扩增激活方法-201610146820.0
- 徐以兵;郑树;梁廷波;朱莉莉;胡薇蕾 - 浙江大学
- 2016-03-15 - 2020-02-07 - C12N5/0783
- 本发明公开了一种使用转染功能蛋白质的宿主细胞,联合多种蛋白质扩增激活CIK细胞的方法。本发明的优点是与现有的方法相比,本发明扩增和激活的CIK细胞的纯度更高、扩增效率更高、杀伤肿瘤和肿瘤微环境中TAMs的能力更强。本发明在控制和缓解部分疾病的进展,如癌症、传染性疾病、糖尿病、或器官移植和乙肝方面具有广阔的前景。
- 生物反应器及其搅拌桨和使用其培养TIL细胞的方法-201610141281.1
- 王一飞;陈海佳;葛啸虎;曾维杰 - 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司
- 2016-03-11 - 2020-01-31 - C12N5/0783
- 本发明公开了一种生物反应器及其搅拌桨和使用其培养TIL细胞的方法。所述搅拌桨外包裹有减小剪切力的材料,所述生物反应器含有其外包裹减小剪切力材料的搅拌桨,使用该生物反应器培养TIL细胞。本发明使用生物反应器培养TIL细胞,在搅拌桨外包裹可以减小剪切力的材料,可以降低细胞受到的剪切力伤害,有利于细胞大量扩增。本发明培养过程中不停的搅拌,为动态系统,有利于细胞进行气体交换和为细胞提供均一的培养环境,有利于细胞大量扩增。本发明方法不仅可以大量扩增TIL细胞,而且所得TIL细胞表面抗原表达量较高,对肿瘤细胞的杀伤活性较强。
- 一种NK细胞培养基及体外扩增NK细胞的方法-201710071737.6
- 于志军;张希涛;韩艳萍 - 广州市鲁诚生物科技有限公司
- 2017-02-09 - 2020-01-31 - C12N5/0783
- 本发明公开了一种NK细胞培养基,包括基础培养基和添加物,添加物各组分及浓度为:8‑12g/L人血清白蛋白、2.5‑7.5mmol/L尼克酰胺、0.5‑2.0μmol/L来那度胺、8‑16mmol/L HEPES。本发明还公开一种体外扩增NK细胞的方法。利用本发明的NK细胞培养基及体外扩增NK细胞的方法,可扩增出数量大、活性高、杀伤性强的NK细胞。
- 生物反应器及其搅拌桨和使用其培养CIK细胞的方法-201610141283.0
- 王一飞;陈海佳;葛啸虎;曾维杰 - 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司
- 2016-03-11 - 2020-01-31 - C12N5/0783
- 本发明公开了一种生物反应器及其搅拌桨和使用其培养CIK细胞的方法。所述搅拌桨外包裹有减小剪切力的材料,所述生物反应器含有其外包裹减小剪切力材料的搅拌桨,使用该生物反应器培养CIK细胞。本发明使用生物反应器培养CIK细胞,在搅拌桨外包裹可以减小剪切力的材料,可以降低细胞受到的剪切力伤害,有利于细胞大量扩增。本发明培养过程中不停的搅拌,为动态系统,有利于细胞进行气体交换和为细胞提供均一的培养环境,有利于细胞大量扩增。本发明方法不仅可以大量扩增CIK细胞,而且所得CIK细胞表面抗原表达量较高,对肿瘤细胞的杀伤活性较强。
- miRNA-155及其抑制剂在DC-CIK细胞培养方面的应用-201611194975.8
- 不公告发明人 - 朗姿赛尔生物科技(广州)有限公司
- 2016-12-22 - 2020-01-31 - C12N5/0783
- 本发明公开了miRNA‑155及其抑制剂在DC‑CIK细胞培养方面的应用,miRNA‑155可以作为药物靶标在提高DC细胞共培养增强的CIK细胞对肿瘤细胞的杀伤力中的应用。申请人研究发现,miRNA‑155下调表达的DC‑CIK细胞比miRNA‑155正常表达的DC‑CIK细胞具有更高的杀伤力,而miRNA‑155下调表达的DC细胞与miRNA‑155正常表达的DC细胞的杀伤力基本一致,无显著性差异。这表明,miRNA‑155下调并不能直接提高DC细胞对白血病细胞的杀伤力,但是miRNA‑155下调的DC细胞可以通过共培养显著增强CIK细胞对肿瘤细胞的杀伤力。申请人还发现,太子参环肽B和太子参环肽C为miRNA‑155的有效抑制剂。
- 自然杀伤细胞的体外纯化方法-201611219859.7
- 易吉辉;李扬兮;江海达;许春莲;毛侃琅 - 深圳精准医疗科技有限公司
- 2016-12-26 - 2020-01-24 - C12N5/0783
- 本发明公开了一种自然杀伤细胞的体外纯化方法,包括如下步骤:提供CD3抗体溶液;将CD3抗体溶液承装在临床级培养容器内,充分反应后得到表面包被有CD3抗体的临床级培养容器;将待纯化的自然杀伤细胞混合培养物承装在包被有CD3抗体的临床级培养容器内,在常规培养条件下培养后收集上清液;对上清液进行离心并保留沉淀,洗涤沉淀得到纯化后的自然杀伤细胞。这种自然杀伤细胞的体外纯化方法利用包被有CD3抗体的临床级培养容器承载自然杀伤细胞混合培养物并培养,自然杀伤细胞混合培养物中的CD3阳性的杂细胞会与CD3抗体结合从而附着在临床级培养容器内壁,培养完成后收集临床级培养容器内的上清即可得到纯化后的自然杀伤细胞。
- T细胞培养基及培养方法-201810747407.9
- 季匡华;王愈善;江欣倩;黄逸君;詹姆斯周 - 广西慧宝源健康产业有限公司;强普生技股份有限公司;桂林商源植物制品有限公司
- 2018-07-09 - 2020-01-17 - C12N5/0783
- 本发明提供了用于培养T细胞的添加剂,其包括白介素‑2、碱性成纤维细胞生长因子、转化生长因子‑α和趋化因子配体5以及任选的特异性培养成分。另外,本发明还提供了包含该添加剂的T细胞培养基及培养T细胞的方法,可以提高T细胞的增殖率,同时可以提高具有增殖活性T细胞以及免疫功能活化T细胞的比例并减少T细胞发生细胞凋亡的状况。
- 检测脐带间充质干细胞影响T淋巴细胞分化的方法-201910949233.9
- 褚一凡;江嘉豪;何美第;陈炽锋;刘锐;王进辉 - 广东唯泰生物科技有限公司
- 2019-10-08 - 2020-01-17 - C12N5/0783
- 本发明提供一种检测脐带间充质干细胞影响T淋巴细胞分化的方法,涉及干细胞与再生医学领域。本发明的检测方法,包括分组培养、刺激T淋巴细胞、检测等步骤,根据共培养组和对照组的检测结果判断脐带间充质干细胞对T淋巴细胞分化的影响。本发明的方法能够更精确、全面的检测脐带间充质干细胞对T淋巴细胞分化的影响。
- 一种体外扩增PD1阴性T淋巴细胞的方法-201810733531.X
- 于军;杜珍武 - 杜珍武
- 2018-07-06 - 2020-01-14 - C12N5/0783
- 本发明公开一种体外有效扩增PD1阴性淋巴细胞的方法。从外周血或组织来源的淋巴细胞在细胞因子白介素2与白介素15联合作用下,经21天扩增培养,经流式检测,该淋巴细胞的表型为PD1阴性T淋巴细胞,占90%以上。
- 一种NK细胞的体外扩增培养方法-201911037240.8
- 张志新;卓越;张勇;杨飞 - 成都益安博生物技术有限公司
- 2019-10-29 - 2020-01-14 - C12N5/0783
- 本发明公开了一种NK细胞体的外扩增培养方法。该方法包括以下步骤:(1)向处理后包含NK细胞的血液中加入刺激因子和终浓度为0.1~10nM的比例调节剂,培养3~4天;(2)调整细胞密度为0.5~1.5×10
- 一种高杀伤活性的免疫细胞群的培养方法-201410247638.5
- 谌兵来;王玲 - 上海厚超生物科技有限公司
- 2014-06-05 - 2020-01-10 - C12N5/0783
- 本发明公开了一种高杀伤活性的免疫细胞群的培养方法,在包含基础培养基、IL‑2、人CD137L、人SCF和任选的ConA的培养基中培养人外周血淋巴细胞,其中,IL‑2的浓度为10‑100ng/ml,人CD137L的浓度为10‑100ng/ml,人SCF的浓度为10‑100ng/ml,ConA的浓度为10‑100ng/ml。本发明的方法简单易于操作,培养时间长,可以获得具有高杀伤活性的免疫细胞群。
- 一种链式NK细胞的培养方法-201911008852.4
- 孔德照;陈杰;方松刚 - 武汉济源高科技有限公司
- 2019-10-23 - 2020-01-03 - C12N5/0783
- 本发明公开一种链式NK细胞的扩增培养方法,包括如下步骤:培养NK细胞前,先提前用单克隆抗体CD56、CD16,以及细胞因子IL‑21、IL‑15包被培养瓶/皿,培养当天收集人外周血、脐血、骨髓等来源的单个核细胞,采用自体细胞饲养层与因子组合2步链式激活,以后根据细胞生长情况及时补液并于第5天添加因子组合再次激活。本发明在前5天内期可以获得高基数活化的高表达CD3—CD56+的NK细胞,通过14天的扩增培养可以获得大量高纯度的自然杀伤NK细胞,能够满足临床治疗肿瘤的需求。
- 用于肿瘤浸润性淋巴细胞快速培养的饲养细胞的制备方法-201911044963.0
- 肖占刚;赵曰水;俞静;文庆莲;李静 - 西南医科大学
- 2019-10-30 - 2020-01-03 - C12N5/0783
- 本发明公开了一种用于肿瘤浸润性淋巴细胞快速培养的饲养细胞的制备方法,本发明所用技术为利用丝裂霉素C来处理外周血淋巴细胞得到饲养细胞,然后用饲养细胞与预培养的肿瘤浸润性淋巴细胞进行共培养。采用本发明的方法制作的饲养细胞扩增肿瘤浸润性淋巴细胞的效率与利用γ射线照射制作的饲养细胞扩增肿瘤浸润性淋巴细胞的效率相比效果更好,同时利用此法的成本显著降低。本发明方法制备方法简单易行,可以广泛推广应用。
- 一种用于NK细胞扩增及增强杀伤活性的脂质体药物的制备方法及其应用-201910805994.7
- 郭猛;王全兴;刘芳;刘艳芳;李芳兵;胡显律;丁国善;曹雪涛 - 中国人民解放军第二军医大学
- 2019-08-29 - 2019-12-31 - C12N5/0783
- 本发明涉及生物医药领域,具体涉及一种用于NK细胞扩增及增强杀伤活性的脂质体药物的制备方法及其应用。所述脂质体表面通过亲和素‑生物素系统挂载了IL‑15片段、IL‑21片段、4‑1BBL片段,可以加入NK细胞扩增体系中作为Feeder,克服了现有NK feeder的缺点,显著减少细胞因子的加入,并增强其对肿瘤细胞的细胞毒活性。本发明为体外NK培养扩增提供了一种新策略,可以在14天中实现外周血NK细胞800~1000倍的扩增,并显著增强NK细胞的杀伤活性,为肿瘤或其他感染性疾病的过继性免疫治疗提供了新方法。
- 一种肿瘤特异性γδ T细胞的制备方法-201711364820.9
- 邹畅;赵盼;郭吉楠;王建红 - 邹畅;赵盼
- 2017-12-18 - 2019-12-27 - C12N5/0783
- 本发明提供了一种肿瘤特异性γδT细胞的制备方法,包括如下步骤:S1,提取肿瘤细胞来源的自噬小体;S2,采集外周静脉血,并从中获取单个核细胞;S3,在所述单个核细胞中加入磷酸抗原唑来膦酸(Zoledronic acid,Zol)因子刺激诱导γδT细胞的扩增培养,获得γδT细胞;S4,将所述自噬小体和所述γδT细胞在预设时间内进行共培养,制备得到肿瘤特异性γδT细胞。本发明通过自噬小体和γδT细胞进行共培养,从而制备得到特异性γδT细胞,对多种肿瘤细胞均有较强的杀伤能力,细胞毒活性明显强于常规方法及抗原制备的γδT细胞,且本发明所提供的制备方法的制备成本低廉、工序简单、条件易控、对设备的要求较低、易于规模化生产。
- T细胞大批量生产装置-201920534794.8
- 华子昂;刘宝全;竹添;孙宁;王姣;张建;万君兴;李娜;朱美瑛 - 华子昂
- 2019-04-19 - 2019-12-27 - C12N5/0783
- 本实用新型涉及一种T细胞大批量生产装置,包括若干并联的T细胞培养巢,所述T细胞培养巢下端设置营养液输入管道,所述T细胞培养巢上端设置营养液回收管道,设置气体交换器实现营养液中氧气与二氧化碳的供给。本实用新型能够实现T细胞的加压培养,能够完成T细胞的大批量小产量生产,能够有效降低T细胞生产成本和提高T细胞活性,有效满足T细胞市场需求。
- 高效扩增脐带血NK细胞的无血清培养方法-201910845554.4
- 阳莉;王太林 - 阳莉
- 2019-09-06 - 2019-12-24 - C12N5/0783
- 本发明涉及一种高效扩增脐带血NK细胞的无血清培养方法,包括以下步骤:1)制作第一培养基和第二培养基;2)抗体包被;3)MNCs分离及自体血浆制备;4)NK细胞诱导培养;5)NK细胞扩大培养;6)NK细胞收集。本发明NK细胞扩增倍数高、纯度高、成本低、操作步骤简便,同样适用于外周血;本发明提供的分离培养方法解决了脐带血淋巴细胞难获得的问题,培养初始阶段排除了红细胞的污染,后期收获的NK细胞纯度均可达到70%以上,弥补了肿瘤病人NK细胞培养纯度低及数量不足的缺点,在同种异体NK细胞回输方面具有巨大的优势;本发明添加物和培养基配方单一,不易混淆和差错,培养流程简单,技术人员可以很容易的实施。
- EPL阻断Treg细胞Kv1.3通道减少外泌体中介的促心肌纤维化作用-201910323867.3
- 程路峰;李梦佳;徐琦;刘玲;马翔;伊力哈木江·克尤木;阿来依·买提卡比力;武洋 - 新疆医科大学
- 2019-04-22 - 2019-12-20 - C12N5/0783
- 本发明公开了依普利酮阻断Treg细胞Kv1.3通道减少外泌体中介的促心肌纤维化作用,涉及医药学生物信息技术相关领域,通过依普利酮直接阻断Kv1.3通道减弱Tregs外泌体分泌而抑制CFs增殖的相关研究,从而使Kv1.3通道可作为抗心肌纤维化的潜在免疫学靶点。EPL通过直接阻断Kv1.3通道对CFs增殖的间接抑制作用,所述的EPL通过直接阻断Kv1.3通道减弱Tregs外泌体(exosome,exo)分泌而对CFs增殖表达发挥抑制作用,Tregs来源的外泌体(Tregs‑exo)与CFs共培养,相较于CFs组,其CFs的增殖升高了84%;Tregs与CFs共培养来源的外泌体[(CFs+Tregs)‑exo]与CFs共培养,相较于CFs组,其CFs的增殖升高了92%;预先加入EPL干预的Tregs来源的外泌体[(Tregs+EPL)‑exo]与CFs共培养,相较于CFs+Tregs‑exo组,其CFs的增殖抑制率为36%。
- 一种在NK细胞治疗中免辐照体外体内持续去除饲养细胞的方法-201910746752.5
- 王瑶;王一飞;梅建勋;苏桂锋 - 广东美赛尔细胞生物科技有限公司
- 2019-08-14 - 2019-12-20 - C12N5/0783
- 本发明涉及一种在NK细胞治疗中免辐照体外体内持续去除饲养细胞的方法,具体的,通过载有自杀基因的慢病毒感染饲养细胞,以含有该饲养细胞的培养基对NK细胞进行培养,可以持续不断的在体内外消除饲养细胞,从而提高临床安全性。
- 一种诱导增强CIK细胞的滇重楼多糖组合物及其应用-201910922512.6
- 刘长宁;李菁;胡翔;黄招琴;马菊莲 - 中国科学院西双版纳热带植物园;云南煜欣农林生物科技有限公司
- 2019-09-27 - 2019-12-20 - C12N5/0783
- 本发明涉及生物医药领域,尤其涉及一种中药诱导增强CIK细胞活性的方法,该方法包括向CIK细胞培养液加入重楼与麦冬提取物,所述重楼提取物为滇重楼多糖,所述麦冬提取物为麦冬多糖,该方法能激活CIK细胞增殖活性与杀瘤活性,提高CIK细胞在体外的杀瘤效果,且通过该方法能获得大量CIK细胞,节省细胞培养时间,利用该方法制备得到的增强型CIK细胞能用于肝脏肿瘤的治疗。
- 一种CIK细胞培养基-201710401453.9
- 罗天恩 - 东莞市保莱生物科技有限公司
- 2017-05-31 - 2019-12-20 - C12N5/0783
- 本发明涉及生物技术领域,尤其涉及一种CIK细胞培养基,包括基础培养基和添加于基础培养基中的添加剂,按终浓度计,所述添加剂包括以下含量的组分:多聚赖氨酸20‑30µg/mL、卡介菌多糖核酸5‑15mg/mL、亚硒酸钠0.03‑0.04μmol/mL、4‑羟乙基哌嗪乙磺酸5‑8µg/mL、还原型谷胱甘肽2‑4μg/L、腺苷脱氨酶8‑12µg/mL、IFN‑γ缓释微球2‑3mg/mL、IL‑2缓释微球1.5‑2mg/mL、自体血浆4‑6mL/L。本发明的CIK细胞培养基各成分相互协调,共同作用,能提供细胞生长增殖所需的充足营养与良好环境,能够提高免疫细胞的活性和增殖能力。
- 一种γδT细胞和NK细胞共培养诱导扩增的方法-201910408512.4
- 邢永梅;邓蒙蒙;程箫;刘丹;吴疆;王保如 - 安徽瑞达健康产业有限公司
- 2019-05-16 - 2019-12-13 - C12N5/0783
- 本发明公开了一种γδT细胞和NK细胞共培养诱导扩增的方法,γδT细胞和NK细胞通过共培养方式获得,通过采集外周血分离筛选单个核细胞并刺激诱导单个核细胞诱导出γδT细胞和NK细胞,后通过活化扩增培养,扩增出具有数量大、扩增倍数高、细胞毒性强等特点的γδT细胞和NK细胞复合细胞物,复合形成一种共培养细胞组合物,其具有非常好的临床应用价值。且该共培养诱导扩增方法提高细胞培养效率,大幅度降低培养成本,也降低了培养技术难度,简化了在临床中治疗过程,也降低了治疗成本,简化了治疗手段。
- 一种体外稳定、大量扩增、高细胞毒活性的NK细胞的方法及应用-201910408514.3
- 邓蒙蒙;程箫;刘丹;吴疆;王保如 - 安徽瑞达健康产业有限公司
- 2019-05-16 - 2019-12-13 - C12N5/0783
- 本发明公开了一种适合于病人自体NK细胞扩增的方法,病人自体的NK细胞在体外稳定的、大量扩增高纯度、高细胞毒活性的NK细胞的方法,步骤为:(1)NK细胞的分血、分选;(2)NK细胞培养;(3)NK细胞收集;本发明NK细胞扩增方法适合于病人自体NK细胞扩增,解决了受者的异体NK细胞治疗时免疫排斥等副反应,采用自体NK细胞的体外分选扩增培养,获得稳定的、高纯度、高活性NK细胞体系,从而能够有效的提供满足临床应用所需的NK细胞,实验操作简单可行。且该培养方法可以获得高扩增倍数的NK细胞数量,可以满意临床需求。
- 体外培养富集人CD4+和CD8+ TCM细胞的方法-201810441998.7
- 张卫红;靳文静;陈瑜;谭曙光;李吴敌 - 英威福赛生物技术有限公司
- 2018-05-10 - 2019-12-10 - C12N5/0783
- 本发明属于细胞培养领域,具体涉及一种体外培养CD4+/CD8+TCM细胞的方法,更具体地,本发明涉及一种使用刺激物组合从人体外周血单个核细胞中大量定向扩增CD4+/CD8+TCM细胞的方法。本发明的技术方案获得的T细胞增殖数量多、状态好,比例接近人体自然状态,同时TCM细胞的含量高。
- 结合有免疫检查点阻断剂的T淋巴细胞及其在制备抗肿瘤药物中的应用-201910859944.7
- 汪超;储家成 - 苏州大学
- 2019-09-11 - 2019-12-06 - C12N5/0783
- 本发明公开了一种结合有免疫检查点阻断剂的T淋巴细胞,其通过将T淋巴细胞分离并体外扩增,并在体外与免疫检查点阻断剂和激动型抗体结合而制得。通过将免疫检查点阻断剂与T淋巴细胞结合,确保了免疫检查点阻断剂随着T淋巴细胞快速进入宿主的免疫系统,人为将免疫检查点阻断剂结合于T淋巴细胞的表面,可快速而有效的弥补T淋巴细胞在自然状态下分泌的免疫检查点阻断剂不足的缺陷。在将本发明的结合有免疫检查点阻断剂的T淋巴细胞回输至宿主后有效抑制了肿瘤细胞的生长,降低癌症复发及转移。利用本发明的T淋巴细胞进行抗肿瘤时,无需了解肿瘤相关抗原,与传统过继转移细胞疗法相比,过程简便易行。
- 一种细胞组合物在癌细胞SMMC-7721上的应用-201910408507.3
- 邢永梅;邓蒙蒙;程箫;刘丹;吴疆;王保如 - 安徽瑞达健康产业有限公司
- 2019-05-16 - 2019-11-29 - C12N5/0783
- 本发明公开了一种细胞组合物,以及该细胞组合物在癌细胞SMMC‑7721及肝癌上的应用。具体涉及γδT细胞和NK细胞共培养细胞系及PD‑1/PD‑L1单抗和/或双特异性抗体,且细胞组合物中的γδT细胞和NK细胞通过共培养方式获得,先刺激诱导单个核细胞扩增为γδT细胞和NK细胞,后通过活化扩增培养,扩增出具有数量大、扩增倍数高、细胞毒性强等特点的γδT细胞和NK细胞复合细胞物,扩增培养后的γδT‑NK细胞与PD‑1/PD‑L1单抗和/或双特异性抗体混合形成细胞组合物,组合物SMMC‑7721杀伤作用强。且该组合物制备方法提高细胞培养效率,大幅度降低培养成本,也降低了培养技术难度,简化了在临床中治疗过程,也降低了治疗成本,简化了治疗手段。
- 一种体外稳定扩增高纯度、高细胞毒活性NK细胞的方法-201910408509.2
- 邓蒙蒙;程箫;刘丹;吴疆;王保如 - 安徽瑞达健康产业有限公司
- 2019-05-16 - 2019-11-29 - C12N5/0783
- 本发明公开了一种体外稳定扩增高纯度、高细胞毒活性NK细胞的方法,具体涉及自体或同种异体外周血单个核细胞在体外稳定的、大量扩增高纯度、高细胞毒活性的NK细胞的方法,步骤为:(1)分离单个核细胞;(2)通过免疫分选去除单个核细胞中的CD3+T淋巴细胞;(3)加入NK细胞培养用无血清细胞培养基及细胞因子IL‑15、IL‑12、IL‑21、IL‑2和OK432,体外培养2‑5天后全换液;(4)NK细胞换液;(5)收获NK细胞。在体外培养条件下稳定扩增大量高纯度、高细胞活性的NK细胞,同时减少T细胞数量,且满足临床应用所需。
- 一种NK细胞评估模型及NK细胞杀伤肿瘤细胞毒力的评价方法-201910696469.6
- 胡劲松;张丹;雷莉;陈萍;王妍梦;吕楠 - 西安交通大学
- 2019-07-30 - 2019-11-29 - C12N5/0783
- 本发明公开了一个提高NK细胞杀伤肿瘤细胞毒力的方法。在体外模拟肿瘤缺氧条件下,(1)NK细胞杀伤肿瘤细胞的能力下降,与此同时,NK细胞毒力相关分子GranzymeB,IFN‑γ,脱颗粒标志物CD107a以及细胞表面杀伤活性受体NKp30,NKp46和NKG2D的表达被显著降低。(2)同时,缺氧所引起的NK细胞毒力降低还与ERK和STAT3这两个NK细胞毒力相关信号通路的活化受到削弱有关,其磷酸化水平被缺氧降低。(3)在NK细胞中,缺氧所降低的ERK和STAT3磷酸化与活化与SHP‑1的表达有关:缺氧会升高SHP‑1表达,而用小分子化合物TPI‑1抑制SHP‑1或利用基因敲低SHP‑1基因表达后,均成功地逆转了缺氧所导致的NK细胞杀伤肿瘤细胞活性的降低。
- 专利分类