[发明专利]一种卵子体外成熟方法在审

专利信息
申请号: 201910181547.9 申请日: 2019-03-11
公开(公告)号: CN110408588A 公开(公告)日: 2019-11-05
发明(设计)人: 张明德 申请(专利权)人: 张明德
主分类号: C12N5/075 分类号: C12N5/075
代理公司: 北京华仲龙腾专利代理事务所(普通合伙) 11548 代理人: 李静
地址: 250001 山东省济南市*** 国省代码: 山东;37
权利要求书: 查看更多 说明书: 查看更多
摘要: 发明公开了一种卵子体外成熟方法,涉及试管婴儿领域,要解决的是现有卵子体外成熟技术的弊端。本发明具体步骤如下:步骤一,取卵后将卵子浸泡在含有卵泡液的试管中,将试管放入温度为37摄氏度的二氧化碳培养箱中培养2‑6小时,如果培养的时间更长,需要进行捡卵;步骤二,将培养后的试管进行离心,除去血细胞,然后放入含有培养液的孔板中培养即可。本发明采用卵泡液对卵子进行培养,更加接近人体环境,培养成本低,可以促进不成熟的卵子体外成熟,增加授精质量和胚胎成功性,用于治疗多万囊卵巢综合征等卵子成熟障碍疾病和补救促排卵不好时的卵子不成熟问题。
搜索关键词: 卵子 体外成熟 试管 卵泡液 放入 培养液 二氧化碳培养箱 卵巢综合征 血细胞 排卵 成熟障碍 人体环境 试管婴儿 成功性 孔板 授精 成熟 补救 浸泡 胚胎 疾病 治疗
【主权项】:
1.一种卵子体外成熟方法,其特征在于,具体步骤如下:步骤一,取卵后将卵子浸泡在含有卵泡液的试管中,将试管放入温度为37摄氏度的二氧化碳培养箱中培养2‑6小时;步骤二,将培养后的试管进行离心,然后放入含有培养液的孔板中培养即可。
下载完整专利技术内容需要扣除积分,VIP会员可以免费下载。

该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于张明德,未经张明德许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服

本文链接:http://www.vipzhuanli.com/patent/201910181547.9/,转载请声明来源钻瓜专利网。

同类专利
  • 一种卵子体外成熟方法-201910181547.9
  • 张明德 - 张明德
  • 2019-03-11 - 2019-11-05 - C12N5/075
  • 本发明公开了一种卵子体外成熟方法,涉及试管婴儿领域,要解决的是现有卵子体外成熟技术的弊端。本发明具体步骤如下:步骤一,取卵后将卵子浸泡在含有卵泡液的试管中,将试管放入温度为37摄氏度的二氧化碳培养箱中培养2‑6小时,如果培养的时间更长,需要进行捡卵;步骤二,将培养后的试管进行离心,除去血细胞,然后放入含有培养液的孔板中培养即可。本发明采用卵泡液对卵子进行培养,更加接近人体环境,培养成本低,可以促进不成熟的卵子体外成熟,增加授精质量和胚胎成功性,用于治疗多万囊卵巢综合征等卵子成熟障碍疾病和补救促排卵不好时的卵子不成熟问题。
  • 磷酸二酯酶5活性抑制剂作为诱导斑马鱼卵母细胞成熟的催熟剂的应用-201910486821.3
  • 李建真;白琳 - 西北师范大学
  • 2019-06-05 - 2019-10-08 - C12N5/075
  • 本发明提供一种磷酸二酯酶5活性抑制剂的一种新用途——即作为诱导斑马鱼卵母细胞成熟的催熟剂,属于水产技术领域。磷酸二酯酶5活性的抑制剂,包括Sildenafil Citrate、Tadalafil和Avanafil。实验表明,Sildenafil Citrate、Tadalafil和Avanafil在促进卵母细胞成熟中均表现出计量依赖性、时间依赖性和时期依赖性,而且在斑马鱼中诱导卵母细胞成熟的效率较高。另外,磷酸二酯酶5活性的抑制剂不仅可用于斑马鱼卵母细胞成熟的诱导,也可能应用于其他鱼类的卵母细胞成熟诱导,因此具备良好的应用前景。
  • 一种侏儒蛤卵膜的分离方法-201910328727.5
  • 黄晓婷;杨祖晶;李茉莉;秦贞奎;曾启繁;陆维;包振民 - 中国海洋大学
  • 2019-04-23 - 2019-07-26 - C12N5/075
  • 本发明公开了一种侏儒蛤卵膜的分离方法,其特征是用低盐的灭菌过滤海水进行低渗5min,用移液枪反复抽打10~20次,直至破碎,接着将破碎的卵子置于离心机中4000r/min,常温离心20~30min,吸取上清置于新的500目筛绢上用灭菌海水冲洗除去卵黄物质,即可获得较为纯净的卵膜。本发明能快速地实现侏儒蛤卵膜的分离和提取,并且由于本发明采用低渗和物理破碎相结合的方法,条件比较温和,不会对卵膜的化学结构造成破坏,这对侏儒蛤卵膜结构和组分、受精过程的精卵识别和转基因研究具有重要意义。
  • 一种人卵母细胞的体外成熟培养液制备方法和培养方法-201910049865.X
  • 周桦 - 周桦;何志旭;赵淑云
  • 2019-01-18 - 2019-04-16 - C12N5/075
  • 本发明公开一种人卵母细胞的体外成熟培养液制备方法和培养方法,包含以下操作步骤:血清制作:将血液放入至离心机内进行离心操作,并取出血清部分备用,抗生素液制作:分别将100ug/ml青霉素、100ug/ml链霉素、50ug/ml卡那霉素和25ug/ml制菌霉素以1:2:1:3的比例充分混合,以此制得抗生素液备用。该人卵母细胞的体外成熟培养液制备方法和培养方法,使用多种盐溶液和抗生素作为辅助生长剂,使用较为普遍的牛犊血清作为基础,同时采用添加NaHCO3和HEPES溶液的方式调节培养液的PH值,给卵母细胞提供生存条件的同时抑制了杂菌的生长,避免了由于杂菌感染而导致的研究困难,同时提高了卵母细胞的体外成熟率,降低了制造成本,降低研究难度的同时方便了使用者的使用。
  • 一种激活增多卵泡的制剂及其应用-201811292953.4
  • 顾军;顾帅;兰丹 - 多能干细胞再生医学科技(广州)有限公司
  • 2018-11-01 - 2019-03-08 - C12N5/075
  • 本发明涉及卵巢组织体外培养技术领域,公开了一种激活增多卵泡的制剂及其应用,该制剂由P13K/Akt/mTOR通路激活剂和/或PTEN抑制剂SF1670组成,所述P13K/Akt/mTOR通路激活剂为5‑15μM他汀类药物,所述PTEN抑制剂为20‑50μM的SF1670。通过使用该制剂能够达到现有技术的激活增多卵泡效果,有助于临床上卵泡体外激活剂的发展和选择,同时该制剂的使用也为他汀类药物开拓了一种新的技术应用领域。
  • 一种高效去除猪未成熟卵母细胞周围卵丘细胞的方法-201811259177.8
  • 曹祖兵;高迪;许腾腾;童旭;张丹丹;王怡青;宁伟;齐昕;刘成雪;张运海 - 安徽农业大学
  • 2018-10-26 - 2019-01-29 - C12N5/075
  • 本发明公开了一种高效去除猪未成熟卵母细胞周围卵丘细胞的方法,包括以下步骤:配制以氯化钠作为溶质,TCM199作为溶剂配制成含有1wt%Nacl的液体,测量液体的渗透压,过滤,分装,加热至38.5℃备用;将卵泡液中的卵丘卵母细胞挑到盛有洗卵液的培养皿中,移入盛有400μL 1wt%Nacl液体的1.5mL离心管中,将离心管置涡旋振荡5分钟,再瞬时离心,转移到培养皿中;借助口吸管针将除去卵丘颗粒细胞的卵母细胞转移至TCM199操作液中,且快速清洗3遍,并置于盛有TCM199液滴中恢复5分钟,本发明通过1wt%Nacl处理去除猪未成熟卵母细胞外围卵丘细胞,具有省时、成本低、安全高效等优势。
  • 一种提高卵母细胞体外成熟质量和效率的方法-201811219334.2
  • 赵学明;朱化彬;郝海生;杜卫华;庞云渭;张燕;刘岩;赵亚涵 - 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
  • 2018-10-19 - 2019-01-11 - C12N5/075
  • 本发明提供了一种提高卵母细胞体外成熟质量和效率的方法,所述方法包括在体外成熟过程中至少更换一次体外成熟液的步骤,以及进一步的包括在体外成熟液中添加一定量的FGF。本发明的方法制备的卵母细胞具有显著提高的细胞核成熟效率和细胞胞质成熟效率,MII期卵母细胞高达95%,皮质颗粒和线粒体正常分布的卵母细胞比例、谷胱甘肽和ATP水平均显著高于正常成熟组;在体外成熟液中添加一定量的FGF,可进一步提高了卵母细胞的成熟质量和效率。本发明的方法制备的卵母细胞经体外受精之后,体外受精效率显著高于正常成熟组,体现为更高的卵裂率、囊胚率和更多的囊胚细胞数,具有重大的应用价值。
  • 一种用于胚胎移植的小鼠模型的构建方法及构建系统-201810915401.8
  • 刘勇;吴晓庆;张胜男 - 阜阳师范学院
  • 2018-08-13 - 2019-01-04 - C12N5/075
  • 本发明属于胚胎移植技术领域,公开了一种用于胚胎移植的小鼠模型的构建方法及构建系统,用于胚胎移植的小鼠模型的构建系统包括:细胞选择模块、体外保存模块、培养液配制模块、显微注射模块、培养模块。本发明通过体外保存模块添加高浓度丙酮酸结合降低培养温度防止卵母细胞老化,延长体外保存时间;本发明通过体外保存模块添加高浓度丙酮酸结合降低培养温度防止卵母细胞老化,延长体外保存时间;本发明体外保存哺乳动物成熟卵母细胞长达42小时不影响发育能力。
  • 一种卵母细胞体外成熟培养液的制备方法-201810934929.X
  • 李博;陈书强;芦洁 - 中国人民解放军第四军医大学
  • 2018-08-16 - 2018-12-07 - C12N5/075
  • 本发明涉及一种卵母细胞体外成熟培养液的制备方法,其特征是:该制备方法步骤如下:步骤1)制备基础IVM培养基;步骤2)在基础IVM培养基中添加脂蛋白,即得:卵母细胞体外成熟培养液。本发明改善了IVM后卵母细胞发育潜力较差,孤雌激活后胚胎发育能力也相对较低的问题,添加脂蛋白后可以使胚胎继续发育到囊胚,添加脂蛋白的IVM培养液提高了胚胎发育潜能,有效的改善了胚胎停育问题。
  • 一种用于试管婴儿气囊式剥卵装置-201810823272.X
  • 滕兆刚 - 滕兆刚
  • 2018-07-25 - 2018-11-27 - C12N5/075
  • 本发明公开了一种用于试管婴儿气囊式剥卵装置,包括操作台,操作台左右两侧上表面固定连接有支架,支架的数量为两个,两个支架内侧上方固定连接有固定杆,固定杆中间内部固定连接有固定滑块,固定滑块竖直方向中间内部固定安装有橡胶圈,橡胶圈中间内部接触式连接有剥卵管,剥卵管上方中间内部接触式连接有按钮。本发明在使用过程中能够更加的稳定,操作起来能够更加的精准,并且剥卵管下方同时安装有剥卵针和吸卵管,使其能够在剥离周围的颗粒细胞后,能够快速对卵母细胞进行吸取,提高剥卵效率,并且将剥离和吸取两道工序合并在一个器械上,使用起来非常方便,实用性强。
  • 一种小鼠卵母细胞的体外成熟培养液及体外成熟培养方法-201810828765.2
  • 张景锋;靖娜娜;郭聪慧;张长兴;朱宽佑;徐秋良;唐国盘 - 河南牧业经济学院
  • 2018-07-25 - 2018-11-16 - C12N5/075
  • 本发明公开了一种小鼠卵母细胞的体外成熟培养液及体外成熟培养方法,体外成熟培养液为含有0.5‑2IU/mL FSH、0.5‑2IU/mL HCG、0.5‑2μg/mL E2、0.02‑0.08mg/mL丙酮酸钠、10%(v/v)FCS的M199培养基。本发明通过探讨FSH、HCG、E2三种激素和丙酮酸钠对小鼠卵母细胞体外成熟培养的影响,深入了解小鼠卵母细胞体外成熟的规律,进而完善小鼠卵母细胞体外成熟培养体系,为后期实验打下良好的基础。实验证明,在完全培养基中同时添加1IU/mL FSH、1IU/mL HCG、1μg/mL E2和0.04mg/mL丙酮酸钠为小鼠卵母细胞体外成熟的最优培养体系。此时COCs和NO卵母细胞体外成熟培养的PB1%平均值为75.8%,NO死亡率为11.37%。
  • 一种用于卵细胞拆蛋的液滴分配系统-201820196349.0
  • 汝长海;魏顶;孙钰;王勇;朱军辉 - 苏州大学
  • 2018-02-05 - 2018-11-13 - C12N5/075
  • 本申请提供了一种用于卵细胞拆蛋的液滴分配系统,所述的液滴分配系统包括工作台、设置在所述的工作台上的用于放置培养皿的载物台、用于向所述的载物台上的培养皿内分别滴加试剂和盖油的分液针头和盖油针头、用于安装所述的分液针头和盖油针头并能够控制分液针头和盖油针头运动的动作执行装置。本申请所述的一种用于卵细胞拆蛋的自动化液滴分配系统,操作简单、液滴制备效率高、液滴定位精度高,能够实现液滴的自动化盖油,防止液滴挥发和受到污染,同时为自动化显微拆蛋打下了基础。
  • 一种玻璃化解冻液及其制备方法-201810610843.1
  • 冯怀亮 - 瑞柏生物(中国)股份有限公司
  • 2018-06-05 - 2018-11-06 - C12N5/075
  • 本发明涉及一种玻璃化解冻液及其制备方法,属于人类辅助生殖技术领域。所述玻璃化解冻液,是将聚蔗糖、海藻糖和蔗糖溶解于含有抗菌素和指示剂的基础盐缓冲溶液中配制而成。本发明所述的解冻液内添加高浓度的蔗糖,可以有效地阻止解冻过程中水的内流速度,防止冰晶的形成,增加存活率,不仅可以有效地保存卵子和胚胎及组织细胞的活力,而且还可以保存DNA的完整性,提高辅助生殖技术的成功率,同时,也为辅助生殖技术的安全性提供了有力保证。
  • 一种定量去核的细胞去核方法-201810409173.7
  • 赵新;刘曜玮;冯泽阳;孙明竹;崔茂盛 - 南开大学
  • 2018-05-02 - 2018-10-02 - C12N5/075
  • 本发明提供了一种定量去核的细胞去核方法,属于细胞级别的显微操作技术领域。该方法的特点是在盲吸法去核过程中,因发现卵母细胞的胞质趋近弹性固体性质,且去核过程中平衡压的降低为线性降低。进而通过对去核过程中的平衡压进行精准控制,可以实现定量的细胞去核。解决了在盲吸法去核过程中去核量难以控制的问题。
  • 一种西藏牦牛卵母细胞体外培养体系-201810448629.0
  • 徐业芬;王玉恒;牛家强;索朗斯珠;强巴央宗 - 西藏农牧学院
  • 2018-05-11 - 2018-09-28 - C12N5/075
  • 本发明涉及一种西藏牦牛卵母细胞体外培养体系。本发明研究发现,在牦牛卵丘卵母细胞复合体(cumulus‑oocyte complexes,COC)体外培养过程中,添加外源BMP15能够显著提高牦牛颗粒细胞增殖,并且对卵母细胞成熟率有显著提高作用。本发明探索了体外成熟过程中BMP15对牦牛COC体外培养的影响及其分子调控机制,可以更进一步了解成熟过程中牦牛卵母细胞的发育机制,以利于提高牦牛卵母细胞体外成熟培养的质量和早期胚胎的发育能力。
  • 清洗卵子或受精卵表面的方法-201610584345.5
  • 蔡立义;陆思嘉 - 序康医疗科技(苏州)有限公司
  • 2016-07-22 - 2018-09-25 - C12N5/075
  • 本发明涉及一种清洗卵子或受精卵表面的方法。具体地,本发明公开的方法包括步骤(1)将未经处理的卵子或未经处理的受精卵置于第一培养皿中,其中,所述第一培养皿经标准细胞培养表面处理且含有第一培养液,所述第一培养液含蛋白;然后加入透明质酸酶处理所述卵子或受精卵,从而得到经第一次处理的卵子或受精卵;(2)将经第一次处理的卵子或受精卵移入第二培养皿中,其中,所述第二培养皿未经表面处理且含有第二培养液,所述第二培养液不含蛋白;然后用带有第三培养液的棒状工具拨动所述卵子或受精卵,其中,所述第三培养液含蛋白;使颗粒细胞和/或多余精子脱离卵子或受精卵表面,从而被彻底清除干净。
  • 一种促进山羊卵泡颗粒细胞增殖的方法-201810024255.X
  • 李拥军;王强;郭海燕;尹修远;瞿静雯;程国虎 - 扬州大学
  • 2018-01-10 - 2018-09-21 - C12N5/075
  • 本发明属于生物学领域,具体涉及一种促进山羊卵泡颗粒细胞增殖的方法。该方法是特异性的增加CDC25C基因表达量以促进山羊卵泡颗粒细胞增殖。具体是目的片段CDC25C基因与pCMV‑HA质粒连接,构建过表达载体pCMV‑HA‑CDC25C,并将阳性重组质粒导入山羊卵泡颗粒细胞内,以特异性提高CDC25C基因在山羊卵泡颗粒细胞中表达水平,并促进山羊卵泡颗粒细胞的增殖。本发明方法能促进山羊卵泡颗粒细胞的增殖;为后续卵母细胞体外培养体系的改良提供了技术支撑。
  • 含Endothelin-1的人类卵母细胞体外成熟培养液和应用-201510421614.1
  • 叶英辉;崔龙;曲凡 - 浙江大学
  • 2015-07-17 - 2018-08-28 - C12N5/075
  • 本发明提供了一种含有Endothelin‑1的人类卵母细胞体外成熟培养液,由A液和B液组成,A液:ET‑1,r‑FSH,体积分数10%SSS;B液:ET‑1,r‑FSH,hCG,体积分数10%SSS,溶剂均为常规基础培养液。本发明通过研究证明该培养液和培养方法具有促进人卵母细胞体外成熟,尤其是胞质成熟的能力,并可提高卵母细胞体外受精后的胚胎发育潜能。本发明是根据人未成熟卵母细胞体外培养时胞质与细胞核发育不平衡影响胚胎体外发育潜能的现状,结合ET‑1在卵丘细胞中的生物学功能和作用研制而成,所述培养液可在体外进行人卵母细胞培养中的应用,有助于优化IVM过程,值得推广应用。
  • 一种用于卵细胞拆蛋的液滴分配系统及液滴分配方法-201810110974.3
  • 汝长海;魏顶;孙钰;王勇;朱军辉 - 苏州大学
  • 2018-02-05 - 2018-06-15 - C12N5/075
  • 本申请提供了一种用于卵细胞拆蛋的液滴分配系统及液滴分配方法,所述的液滴分配系统包括工作台、设置在所述的工作台上的用于放置培养皿的载物台、用于向所述的载物台上的培养皿内分别滴加试剂和盖油的分液针头和盖油针头、用于安装所述的分液针头和盖油针头并能够控制分液针头和盖油针头运动的动作执行装置。本申请所述的一种用于卵细胞拆蛋的自动化液滴分配系统及分配方法,操作简单、液滴制备效率高、液滴定位精度高,能够实现液滴的自动化盖油,防止液滴挥发和受到污染,同时为自动化显微拆蛋打下了基础。 1
专利分类
×

专利文献下载

说明:

1、专利原文基于中国国家知识产权局专利说明书;

2、支持发明专利 、实用新型专利、外观设计专利(升级中);

3、专利数据每周两次同步更新,支持Adobe PDF格式;

4、内容包括专利技术的结构示意图流程工艺图技术构造图

5、已全新升级为极速版,下载速度显著提升!欢迎使用!

请您登陆后,进行下载,点击【登陆】 【注册】

关于我们 寻求报道 投稿须知 广告合作 版权声明 网站地图 友情链接 企业标识 联系我们

钻瓜专利网在线咨询

400-8765-105周一至周五 9:00-18:00

咨询在线客服咨询在线客服
tel code back_top