[发明专利]双重信号增强纸基生物传感器在miRNA检测中的应用在审
| 申请号： | 201910010953.9 | 申请日： | 2019-01-07 |
| 公开（公告）号： | CN109628557A | 公开（公告）日： | 2019-04-16 |
| 发明（设计）人： | 于京华;殷雪梅;葛慎光 | 申请（专利权）人： | 济南大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6825 | 分类号： | C12Q1/6825;C12Q1/682 |
| 代理公司： | 济南誉丰专利代理事务所(普通合伙企业) 37240 | 代理人： | 李茜 |
| 地址： | 250022 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种成本低、灵敏度高、可视化检测miRNA的荧光/比色双模式传感器的制备方法并成功用于miRNA检测。利用蜡打印技术制备纸芯片，在荧光层工作区域生长铂纳米粒子，利用石墨相氮化碳纳米片对钯纳米团簇的猝灭效应，以及双工特定核酸酶实现核酸循环信号放大，从而实现小分子miRNA的精确测量。将制备好的纸芯片折叠，在反应区域滴加显色溶液，可实现可视化预测定；随后将纸芯片放入荧光皿中，实现荧光精确测定miRNA。此操作简便快速，省时省力，为miRNA的检测提供了一种新的可靠方法。 | ||
| 搜索关键词： | 纸芯片 荧光 制备 铂纳米粒子 氮化碳纳米 可视化检测 生物传感器 反应区域 工作区域 纳米团簇 双重信号 显色溶液 循环信号 猝灭效应 核酸酶 可视化 灵敏度 石墨相 双模式 小分子 荧光层 折叠 传感器 比色 滴加 放入 核酸 省时 双工 纸基 省力 打印 放大 测量 生长 检测 预测 应用 成功 | ||
【主权项】：
1.双重信号增强纸基生物传感器在miRNA检测中的应用，其特征包括以下步骤：1.1设计纸芯片荧光层和比色层的疏水蜡打印区域和亲水工作区域；1.2在荧光区域和亲水工作区域生长铂纳米粒子（Pt NPs）；1.3将类石墨氮化碳纳米片（g‑C3N4 NSs）固定在步骤1.2所得纸芯片的工作区域，随后将DNA修饰的钯纳米链（DNA‑Pd NCs）固定上去，完成荧光猝灭；1.4将待测miRNA链固定在步骤1.3所得纸芯片的工作区域，引入双工特定核酸酶（DSN）进行核酸循环信号放大；1.5将步骤1.4所得纸芯片折叠，在比色层的工作区域滴加显色底物、pH为4~6的缓冲溶液和过氧化氢，进行比色预测定；1.6精确荧光测定：将步骤1.4所得的纸芯片放入荧光设备中，在激发波长380 nm和发射波长460 nm下进行荧光测定。
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