[发明专利]检测中药材污染杂色曲霉菌素产生菌的PCR引物、方法及试剂盒在审
| 申请号： | 201811594728.6 | 申请日： | 2018-12-25 |
| 公开（公告）号： | CN109576354A | 公开（公告）日： | 2019-04-05 |
| 发明（设计）人： | 徐晖;罗朝权;詹若挺;陈蔚文;王文丽;鲁晓芳;郑润生 | 申请（专利权）人： | 广州中医药大学（广州中医药研究院） |
| 主分类号： | C12Q1/686 | 分类号： | C12Q1/686;C12Q1/6895;C12Q1/04;C12N15/11 |
| 代理公司： | 广州新诺专利商标事务所有限公司 44100 | 代理人： | 张玲春 |
| 地址： | 510006 广东省广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种检测中药材污染杂色曲霉毒素产毒真菌的PCR引物、方法及试剂盒。基于PCR检测方法，包括能在反应管中进行PCR反应的引物对。本发明建立了一种不经过分离纯化，直接检测中药材污染杂色曲霉毒素产毒真菌的PCR体系，各引物特异性强，方法的检出限为101～102CFU/g，检测灵敏度高。 | ||
| 搜索关键词： | 中药材 杂色曲霉毒素 试剂盒 真菌 污染 基于PCR检测 检测灵敏度 引物特异性 分离纯化 直接检测 产生菌 反应管 检出限 曲霉菌 种检测 杂色 引物 检测 | ||
【主权项】：
1.检测中药材污染杂色曲霉菌素产生菌的PCR引物，其特征在于：以扩增杂色曲霉毒素共同的合成基因AFST，包括正向引物AFST‑1F和反向引物AFST‑1R，分别包括SEQ ID NO.01和SEQ ID NO.02所示的序列；正向引物AFST‑1F为5’‑GGCCCTTGTGGTGGGGTTCAAATCGGTGA‑3’，反向引物AFST‑1R为5’‑CTTAGGTGACGACTTGGCGGGCTTTGATC‑3’。
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- 基于高分辨熔解曲线形状的多重PCR检测方法及试剂盒-201910574965.4
- 徐秦峰;马西亚;贺晓玲 - 陕西科技大学
- 2019-06-28 - 2019-08-30 - C12Q1/686
- 本发明公开了一种基于高分辨熔解曲线形状的多重PCR检测方法及试剂盒。本发明采用PCR饱和荧光染料，扩增完成后直接进行高分辨熔解，对采集的熔解曲线进行归一化、差异化或主成分分析，即可实现单管有效同时检测多个靶序列的目的。根据高分辨熔解曲线形状信息而非熔解温度来进行鉴别检测，显著降低了多重PCR分析引物的设计难度，使得具有微小Tm差异的多个PCR扩增产物能够同时检测；避免了开管操作造成目的DNA被污染的可能性，弥补了多色荧光标记或者空间分隔平行下的单重扩增反应成本较高的缺陷，提高了检测通量，降低了检测成本，具有较强的实际应用价值。
- 一种人类红细胞血型系统ABO抗原的多重PCR-SBT基因分型方法及试剂-201811609618.2
- 朱发明;应燕玲;洪小珍;何吉;许先国;陈舒;马开荣 - 浙江省血液中心
- 2018-12-27 - 2019-08-30 - C12Q1/686
- 本发明属于基因分型检测方法技术领域，具体涉及一种用于人类红细胞血型系统ABO抗原的多重PCR‑SBT基因分型方法。本发明还涉及一种人类红细胞血型系统ABO抗原基因分型的多重PCR‑SBT试剂。本发明所提供的试剂和方法可作为一种独立的、应用广泛的鉴定方法，解决了ABO抗原系统快速准确定型的问题，发挥多重PCR‑SBT对ABO基因定型操作高通量、结果准确的特点，在临床输血医学研究和遗传学等领域的相关应用将受到高度重视，对于医学研究单位、药学研究和试剂开发单位具有重要的现实意义。
- 用于低浓度核酸样品的测量方法-201810364807.1
- 味正唯;黄章维;邱创汎 - 奎克生技光电股份有限公司
- 2018-04-23 - 2019-08-27 - C12Q1/686
- 本发明提供一种用于低浓度核酸样品的测量方法。所述测量方法是一种对qPCR实验中待测样品处于低浓度核酸范围的核酸定量方法，本方法通过修正原始Cq值以延伸实验检测的线性动态范围并增加检测灵敏度。所述方法包括以下步骤，提供具有多个反应孔的测试载具，以对核酸样品进行qPCR反应，接着根据以阳性反应孔的数目所得到的阳性孔量测值进行调整步骤，以修正所述qPCR反应Cq值至预期的线性范围表现值。
- 一种人类血小板同种抗原基因分型的检测方法和检测试剂盒-201910229082.X
- 王文忠;张为;田军龙;胡军;陈更新 - 为康（苏州）基因科技有限公司
- 2019-03-25 - 2019-08-27 - C12Q1/686
- 本发明提供了一种人类血小板同种抗原基因分型的检测方法，其特征在于，通过设计出特异性引物再利用单管多重PCR扩增反应得到目标片段，设计出单碱基延伸引物后进行单碱基延伸后，通过质谱分析精确测量目标DNA序列。可一次性检测血小板同种抗原HPA‑1～21bw等位基因。然后直接打质谱，直接出数据。整个过程封闭，时间短，成本低。通过对患者和供血者血小板同种抗原基因分型检测，可以找到配型成功的血小板，有效避免免疫因素引起的血小板输注无效的问题。本产品成本低，更准确，有望作为一种临床常规检测手段，替代血清学的检测方法。
- 一种食源性致病菌单增李斯特菌PCDR法检测试剂-201910444774.6
- 孙新城;白艳红;张靖楠;张勇;景建洲;胡金强;赵电波;高辉;耿尧;张华;侯佩 - 郑州轻工业学院
- 2019-05-27 - 2019-08-27 - C12Q1/686
- 本发明涉及食源性致病菌单增李斯特菌PCDR法检测试剂，可有效解决高灵敏度PCDR法快速、准确检测食源性致病菌单增李斯特菌的问题，方法是，由以下组分：SD缓冲液、dNTPs、Mg2+、1对上、下游内引物、1对上、下游外引物，SD DNA聚合酶，加超纯水混匀制成；使用时：将单增李斯特菌的基因组DNA溶解在ddH2O中，取DNA和本发明检测试剂混合在一起，在EP管中混匀；将反应管放置于PCR仪中反应、预变性、退火、延伸，循环，再琼脂糖凝胶电泳检测，即可实现PCDR法对食源性致病菌单增李斯特菌的检测。本发明组分科学合理，易生产制备，使用方便，能够快速、灵敏、特异性检测食源性致病菌单增李斯特菌，确保食品安全，有显著的经济和社会效益。
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