[发明专利]TRV载体介导的病毒诱导基因沉默系统接种牡丹花器官的方法在审
| 申请号： | 201811057880.0 | 申请日： | 2018-09-11 |
| 公开（公告）号： | CN109022483A | 公开（公告）日： | 2018-12-18 |
| 发明（设计）人： | 张延龙;张庆雨;谢力行;孙道阳;牛立新;杨伟宗 | 申请（专利权）人： | 西北农林科技大学 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82 |
| 代理公司： | 西安通大专利代理有限责任公司 61200 | 代理人： | 范巍 |
| 地址： | 712100 陕*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种TRV载体介导的病毒诱导基因沉默系统接种牡丹花器官的方法：将TRV病毒载体转化农杆菌，对含有TRV的阳性克隆经培养后以注射接种方式侵染花器官。经本发明方法接种过的牡丹花器官，在花瓣、雄蕊、雌蕊、萼片等组织中均可以检测到TRV病毒载体的存在，并出现TRV侵染的症状。本发明为病毒诱导基因沉默技术在牡丹花器官发育过程相关基因研究中的应用提供了一种快捷、高效的侵染方法。 | ||
| 搜索关键词： | 牡丹花 病毒诱导基因 器官 侵染 接种 病毒载体 介导 雄蕊 器官发育 相关基因 阳性克隆 应用提供 注射接种 农杆菌 雌蕊 花瓣 检测 转化 研究 | ||
【主权项】：
1.一种TRV载体介导的病毒诱导基因沉默系统接种牡丹花器官的方法，其特征在于：该接种牡丹花器官的方法包括以下步骤：1)将病毒载体TRV1以及TRV2或者将病毒载体TRV1以及插入有目的基因的重组TRV2分别转化农杆菌，将转化得到的含有TRV1的阳性农杆菌与含有TRV2或重组TRV2的阳性农杆菌经培养后于侵染缓冲液中混合，得混合菌液；2)经过步骤1)后，用带针头的注射器吸取混合菌液，然后将针头于发育中的牡丹花器官处插入牡丹植株内部并进行注射接种，直至该牡丹花器官表面有液体渗出时停止注射；3)注射结束后采用以下条件对牡丹植株进行培养：温度为21～25℃，湿度为60～70％，光照强度为1800～2000Lx。
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