[发明专利]多交叉扩增结合纳米生物传感器检测钩端螺旋体的方法有效
| 申请号： | 201811040029.7 | 申请日： | 2018-09-06 |
| 公开（公告）号： | CN109112186B | 公开（公告）日： | 2021-09-07 |
| 发明（设计）人： | 李世军;刘英 | 申请（专利权）人： | 贵州省疾病预防控制中心 |
| 主分类号： | C12Q1/6844 | 分类号： | C12Q1/6844;C12Q1/04;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京市众天律师事务所 11478 | 代理人： | 李新军 |
| 地址： | 550004 贵州*** | 国省代码： | 贵州;52 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种多交叉恒温扩增结合高分子纳米生物传感器检测钩端螺旋体的方法，所述方法使用独特设计的多交叉置换扩增引物，同时提供在多交叉置换扩增中的扩增引物C1的5’端标记生物素的引物，以及在扩增引物D1的5’端标记半抗原的引物。所述方法针对致病性钩端螺旋体LipL41基因的扩增产物能被高分子纳米生物传感器可视化检测。所述方法便捷、快速、敏感、特异，适宜于致病性钩端螺旋体的特异检测。 | ||
| 搜索关键词： | 交叉 扩增 结合 纳米 生物 传感器 检测 螺旋体 方法 | ||
【主权项】：
1.一种多交叉恒温扩增结合高分子纳米生物传感器检测钩端螺旋体的方法，所述方法包括以下步骤：(1)提取待检测样品的基因组；(2)提供置换引物F1和F2，提供交叉引物CP1和CP2；提供扩增引物C1和C2，D1和D2，R1和R2，同时提供在所述扩增引物C1或C2的5’端标记生物素的扩增引物C1*或C2*；同时提供在所述扩增引物D1或D2的5’端标记半抗原的扩增引物D1*或D2*；所述置换引物F1的序列如SEQ ID NO:1所示，所述置换引物F2的序列如SEQ ID NO:2所示；所述交叉引物CP1的序列如SEQ ID NO:3所示，所述交叉引物CP2的序列如SEQ ID NO:4所示，引物C1的序列如SEQ ID NO:5所示，引物C2的序列如SEQ ID NO:6所示，引物D1的序列如SEQ ID NO:7所示，引物D2的序列如SEQ ID NO:8所示，引物R1的序列如SEQ ID NO:9所示，引物R2的序列如SEQ ID NO:10所示；(3)在链移位型聚合酶、解链温度调节剂、引物存在下，使用待检测样品的基因组核酸作为模板恒温扩增DNA；(4)使用高分子纳米生物传感器检测步骤(3)的扩增产物。
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