[发明专利]一种提高基因突变检测灵敏度的方法在审
| 申请号： | 201810899234.2 | 申请日： | 2018-08-08 |
| 公开（公告）号： | CN108998504A | 公开（公告）日： | 2018-12-14 |
| 发明（设计）人： | 鲍伟胜;王春雷 | 申请（专利权）人： | 鲍伟胜;王春雷 |
| 主分类号： | C12Q1/6827 | 分类号： | C12Q1/6827 |
| 代理公司： | 合肥天明专利事务所(普通合伙) 34115 | 代理人： | 赵瑜;奚华保 |
| 地址： | 加拿大安大略*** | 国省代码： | 加拿大;CA |
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| 摘要： | 本发明涉及基因突变检测技术，具体涉及一种提高基因突变检测灵敏度的方法，包括以下几个步骤：S1、靶向DNA序列的PCR扩增；S2、PCR产物的纯化；S3、突变型特异性引物的延伸；S4、突变型基因DNA片段的杂交和富集。与传统的用作基因突变检测的ASPE技术不同，本发明的突变型特异性引物的延伸反应体系中，只加入突变型的前向引物和未标记的dNTPs；并且在突变型基因DNA片段的杂交后，通过核酸的变性和复性过程，而富集突变型基因DNA片段。该方法除去测序体系中占有主要部分的野生型基因DNA片段，富集了突变型基因DNA片段，显著的提高Sanger和NGS测序的灵敏度，理论上的提高能够达到100倍的数量级。本发明既可以富集单个的突变基因位点，又可以同时富集多个突变基因位点。 | ||
| 搜索关键词： | 富集 基因突变检测 突变型基因 灵敏度 突变型 突变基因位点 特异性引物 测序 杂交 变性和复性 野生型基因 前向引物 延伸反应 靶向DNA 传统的 核酸 延伸 | ||
【主权项】：
1.一种提高基因突变检测灵敏度的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、靶向DNA序列的PCR扩增；S2、扩增后PCR产物的纯化；S3、利用突变型特异性引物对纯化后扩增PCR产物进行延伸；S4、对延伸后的突变型基因DNA片段进行杂交和富集。
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