[发明专利]一种非病毒转染试剂及其制备方法和应用在审
| 申请号： | 201810887390.7 | 申请日： | 2018-08-06 |
| 公开（公告）号： | CN109136270A | 公开（公告）日： | 2019-01-04 |
| 发明（设计）人： | 黄新珠;江福能;张蓓;邹翠云;钟惟德 | 申请（专利权）人： | 广州辉园苑医药科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/87 | 分类号： | C12N15/87 |
| 代理公司： | 广州容大益信专利代理事务所(普通合伙) 44397 | 代理人： | 牛丽霞;汪小梅 |
| 地址： | 510000 广东省广州市*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明属于基因工程领域,尤其涉及一种转染试剂及其制备方法和应用，所述转染试剂组成为：终浓度为10～50ng/ml的阳离子聚合物、终浓度为0.1～20μg/ml的重组多肽、终浓度为5～80ng/ml的阳离子脂质体。本发明能够显著提高具有单一溶酶体逃逸效应的非病毒载体的转染效率，进而提高核酸的递送效率；此外，本发明采用分子自组装方法，可以方便的大规模制备转染复合物，而且该复合物在生物体内可降解，具有较高的使用安全性。 | ||
| 搜索关键词： | 转染试剂 制备方法和应用 制备转染复合物 基因工程领域 阳离子聚合物 阳离子脂质体 非病毒载体 分子自组装 使用安全性 重组多肽 转染效率 非病毒 复合物 可降解 溶酶体 递送 核酸 体内 | ||
【主权项】：
1.一种非病毒转染试剂，其特征在于，包括：终浓度为10～50ng/ml的阳离子聚合物、终浓度为0.1～20μg/ml的重组多肽和终浓度为5～80ng/ml的阳离子脂质体。
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- 本发明提供一种KCl低渗低电导率电穿孔缓冲液，每100ml缓冲液含30mM KCl。通过将Hela细胞消化，并重悬在缓冲液中，加入质粒混匀，进行电穿孔，将电击后细胞继续培养，行流式细胞术，即可分析EGFP阳性细胞比例。本发明所述低渗低电导率电穿孔缓冲液，因其低渗、低电导率的性质，可达到较高的电穿孔效率。本发明经比较转染效率，证明低渗低电导率缓冲液在用量相同情况下转染效率显著高于DMEM，而且在价格上明显低于市售商品。本发明所述KCl低渗低电导率电穿孔缓冲液，配置简便，价格低廉，转染效率显著高于DMEM培养基，易于推广。
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- 孙泽玮;陈文静;郑良荣 - 浙江大学
- 2018-11-15 - 2019-04-09 - C12N15/87
- 本发明提供一种低渗低电导率电穿孔缓冲液，所述缓冲液每100ml含30mM NaCl。通过将Hela细胞消化，并重悬在缓冲液中，加入质粒混匀，进行电穿孔，将电击后细胞继续培养，行流式细胞术，即可分析EGFP阳性细胞比例。本发明所述低渗低电导率电穿孔缓冲液，因其低渗、低电导率的性质，可达到较高的电穿孔效率。本发明经比较转染效率，证明低渗低电导率缓冲液在用量相同情况下转染效率显著高于DMEM，而且在价格上明显低于市售商品。本发明所述低渗低电导率电穿孔缓冲液，配置简便，价格低廉，转染效率显著高于DMEM培养基，易于推广。
- 纳米颗粒及其制备方法-201710883289.X
- 张龙;吴延恒;顾文艺;许志平;李疆;吴沛宏 - 广州宏柯源生物科技有限公司
- 2017-09-26 - 2019-04-02 - C12N15/87
- 本发明公开了一种纳米颗粒及其制备方法：将有机溶剂与表面活性剂混合，得A液；第一反应物溶液与功能物质溶液混合，得B液；第二反应物溶液与功能物质溶液混合，得C液；第二反应物与第一反应物接触后能够形成沉淀；混匀A液、B液得D液；混匀A液、C液，并向所得混合溶液中加入DOPA溶液混匀，得E液；将E液加入D液，对所得混合物离心，收集沉淀，得单层膜纳米颗粒；制备单层膜纳米颗粒的分散液，并向分散液中加入DOPC、胆固醇的混合物，或者加入DOTAP、胆固醇的混合物，所得悬浮颗粒溶液中的颗粒即为双层膜纳米颗粒。本发明通过分步混合有机溶剂、表面活性剂、第一反应物溶液、功能物质溶液，提高了携带功能物质的纳米颗粒对靶细胞的转染效率。
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