[发明专利]重组基因工程菌发酵合成L-乳酸的方法在审
| 申请号： | 201810376571.3 | 申请日： | 2018-04-25 |
| 公开（公告）号： | CN108660165A | 公开（公告）日： | 2018-10-16 |
| 发明（设计）人： | 胡晓;马明超;胡曼曼;李明同;安明;孙永先;王玉成;王理想 | 申请（专利权）人： | 安徽瑞赛生化科技有限公司 |
| 主分类号： | C12P7/56 | 分类号： | C12P7/56;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 235058 *** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明公开了重组基因工程菌发酵合成L‑乳酸的方法，是将乳杆菌属乳酸脱氢酶基因Idhl整合进光滑球拟酵母菌基因MTⅡa,形成重组DNA基因IdhⅡa。通过PCR克隆，并经修饰后插入大肠杆菌表达载体pTE28aT7构建L‑乳酸工程菌pTE28aT7‑IdhⅡa；在异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）诱导下，在含有葡萄糖的限制培养基中，经发酵合成L‑乳酸；通过过滤发酵液、有机溶剂萃取结晶和组合溶剂重结晶获得产品L‑乳酸。本发明的重组基因工程菌发酵合成L‑乳酸的方法简明、产量高、成本低廉，在L‑乳酸的微生物法制备中发挥重要的作用，应用前景广阔。 | ||
| 搜索关键词： | 乳酸 重组基因工程菌 发酵 合成 异丙基硫代半乳糖苷 乳酸脱氢酶基因 酵母菌 大肠杆菌表达 微生物法制备 应用前景广阔 有机溶剂萃取 葡萄糖 过滤发酵液 乳杆菌属 组合溶剂 培养基 重组DNA 工程菌 光滑球 重结晶 基因 构建 整合 修饰 诱导 克隆 | ||
【主权项】：
1.本发明涉及重组基因工程菌发酵合成L‑乳酸的方法，包括：（1）是将乳杆菌属乳酸脱氢酶基因Idhl整合进光滑球拟酵母菌基因MTⅡa,形成重组DNA基因IdhⅡa；（2）通过PCR扩增，并经修饰后插入大肠杆菌表达载体pTE28aT7，构建L‑乳酸工程菌pTE28aT7‑IdhⅡa；（3）在异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）诱导下，采用高通量筛选法筛选高效菌株；（4）在含有葡萄糖的限制培养基中，经发酵合成L‑乳酸，通过过滤发酵液、有机溶剂萃取结晶和组合溶剂重结晶获得产品L‑乳酸。
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