[发明专利]基于FRET效应探测细胞凋亡过程的方法有效
| 申请号： | 201810366318.X | 申请日： | 2018-04-23 |
| 公开（公告）号： | CN108732147B | 公开（公告）日： | 2021-01-19 |
| 发明（设计）人： | 张寅;朱恒宇;吴琦;赵强;刘淑娟;黄维 | 申请（专利权）人： | 南京邮电大学 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64;C07F15/00;C09K11/06 |
| 代理公司： | 南京苏科专利代理有限责任公司 32102 | 代理人： | 陈忠辉 |
| 地址： | 210003 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明提供一种基于FRET效应来探测细胞凋亡过程的方法，其主要步骤是：制备具有长寿命的磷光铱配合物作为给体D，制备短寿命有机荧光小分子化合物作为受体A，D和A两者之间存在FRET效应；通过生物正交反应，将给体D和受体A分别连接到能够被仅存在于细胞凋亡过程中的caspase酶剪切的肽链的两端，构成D‑A型探针，所述D‑A型探针可以在细胞外组装构成然后植入到细胞内部，也可以直接在细胞内组装；利用共聚焦成像或寿命成像技术，检测D‑A型探针当中给体D或受体A的寿命变化，从而判断细胞的凋亡进程。本发明可应用于细胞凋亡各个阶段，能够分辨细胞凋亡的各个时期，在细胞成像、生物标记和传感领域等方面具有非常重要的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 fret 效应 探测 细胞 过程 方法 | ||
【主权项】：
1.基于FRET效应探测细胞凋亡过程的方法，包括以下步骤：S1，制备具有长寿命的磷光铱配合物作为给体D；S2，制备有机荧光小分子化合物作为受体A，受体A的寿命比给体D短，两者之间存在FRET效应；S3，通过生物正交反应，将给体D和受体A分别连接到肽链的两端构成D‑A型探针，所述肽链是能够被仅存在于细胞凋亡过程中的caspase酶剪切的肽链，所述D‑A型探针可以在细胞外组装构成然后植入到细胞内部，也可以直接在细胞内组装；S4，利用共聚焦成像或寿命成像技术，检测D‑A型探针当中给体D的寿命变化，判断细胞的凋亡进程；或检测D‑A型探针当中受体A的寿命变化，判断细胞的凋亡进程。
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