[发明专利]一种获得高纯度鸡精子的方法有效
申请号: | 201810257972.7 | 申请日: | 2018-03-27 |
公开(公告)号: | CN108624552B | 公开(公告)日: | 2020-11-27 |
发明(设计)人: | 陈继兰;李云雷;孙研研;麻慧;叶建华;倪爱心;谢金防 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 |
主分类号: | C12N5/076 | 分类号: | C12N5/076 |
代理公司: | 苏州言思嘉信专利代理事务所(普通合伙) 32385 | 代理人: | 刘巍 |
地址: | 100019 北京市海淀区圆明*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了一种获得高纯度鸡精子的方法,包括以下步骤:1)将采集到的鸡精液稀释后,过滤;2)配制不连续的密度梯度离心介质,将过滤后的鸡精液小心地加入到密度梯度离心介质上层,离心收集鸡精子沉淀;3)将收集的鸡精子沉淀离心后,洗涤后稀释;4)将稀释后的鸡精液过滤,将工作液加入过滤后的鸡精液中进行染色;5)染色后的鸡精液过滤后,分装到无菌流式上样管中,通过流式细胞仪进行分选,收集纯化后的鸡精子。本发明采用Percoll不连续密度梯度离心法获取活力较高的精子的基础上,进一步使用流式技术,大大提高了精子的纯度,有效降低其他细胞的污染,最终获取了高纯度、高活力的活精子。 | ||
搜索关键词: | 一种 获得 纯度 精子 方法 | ||
【主权项】:
1.一种获得高纯度鸡精子的方法,其特征在于,包括以下步骤:1)将采集到的鸡精液用稀释液稀释后,通过无菌过滤器进行过滤;2)配制不连续的密度梯度离心介质,将过滤后的鸡精液小心地加入到不连续的密度梯度离心介质上层,离心后,收集鸡精子沉淀;3)将收集的鸡精子沉淀离心后,洗涤,然后用稀释液稀释;4)将稀释后的鸡精液通过无菌过滤器进行过滤,将工作液加入过滤后的鸡精液中进行染色;5)染色后的鸡精液通过无菌过滤器进行过滤后,分装到无菌流式上样管中,通过流式细胞仪进行分选,收集纯化后的鸡精子。
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