[发明专利]一种悬浮细胞生产重组禽流感病毒灭活疫苗的方法有效

专利信息
申请号: 201711407815.1 申请日: 2017-12-22
公开(公告)号: CN108042798B 公开(公告)日: 2020-10-16
发明(设计)人: 陈宏;冯玉强;李金祥;朱长动;李莉;王玉红;蒋晓梅;张天舒 申请(专利权)人: 吉林冠界生物技术有限公司
主分类号: A61K39/145 分类号: A61K39/145;A61P31/16;C12N7/00;C12N7/04
代理公司: 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 代理人: 李进
地址: 134000 吉*** 国省代码: 吉林;22
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摘要: 发明涉及一种悬浮细胞生产重组禽流感病毒灭活疫苗的方法,包括:1).驯化种毒和MDCK细胞;2).取经摇瓶培养好的悬浮MDCK细胞,逐步放大培养直至终级反应器;待终级反应器细胞密度达到8.0×106.0~1.0×107.0个细胞/ml时接入步骤1)中驯化好的病毒进行病毒培养;所述终级反应器为3000L~6000L的生物反应器;3).当CPE达到75%以上时收获病毒液并取样检验病毒质量;将所述病毒液中的病毒纯化浓缩后进行病毒灭活,得到疫苗半成品;4).将所述疫苗半成品乳化处理后得到油乳剂疫苗,经成品质量检验后包装既得疫苗商品。本发明能够流程化地大量、安全、高效、低成本的生产禽流感疫苗。
搜索关键词: 一种 悬浮 细胞 生产 重组 禽流感 病毒 疫苗 方法
【主权项】:
1.一种悬浮细胞生产重组禽流感病毒灭活疫苗的方法,其特征在于,包括:1).驯化MDCK细胞使其适应全悬浮培养环境;驯化H5亚型重组禽流感病毒或H7亚型的重组禽流感病毒种毒使得其适应全悬浮培养环境下的MDCK细胞培养;2).取经摇瓶培养好的悬浮MDCK细胞,接种于1L~7L的生物反应器中进行预培养,随后逐步放大培养直至终级反应器;待终级反应器细胞密度达到8.0×106.0~1.0×107.0个细胞/ml时接入步骤1)中驯化好的病毒进行病毒培养;所述终级反应器为3000L~6000L的生物反应器;3).当CPE达到75%以上时收获病毒液并取样检验病毒质量;将所述病毒液中的病毒纯化浓缩后进行病毒灭活,得到疫苗半成品;4).将所述疫苗半成品乳化处理后得到油乳剂疫苗,经成品质量检验后包装既得疫苗商品。
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