[发明专利]一种合成L-苯甘氨酸的单细胞工厂及其构建与应用有效
| 申请号： | 201711352466.8 | 申请日： | 2017-12-15 |
| 公开（公告）号： | CN108103038B | 公开（公告）日： | 2021-03-02 |
| 发明（设计）人： | 饶志明;刘巧利;杨套伟;周俊平;张显;徐美娟 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N9/06 | 分类号： | C12N9/06;C12N15/53;C12N15/70;C12P13/04;C12R1/19 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 张勇 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种高效合成L‑苯甘氨酸的单细胞工厂及其构建与应用，属于微生物技术领域。本发明首先实现了来源于Bacillus cereus的亮氨酸脱氢酶在大肠杆菌中的高效表达，并通过定点突变得到还原特性显著提高的突变体N71S，并将该突变酶与甲酸脱氢酶突变体在大肠杆菌中共表达，形成胞内原位辅因子NADH循环体系，通过启动子和RBS序列优化控制甲酸脱氢酶突变体的表达量，成功构建了重组大肠杆菌单细胞工厂，并利用单细胞工厂进行全细胞转化制备L‑苯苷氨酸，该方法转化过程简单快捷，成本低廉，没有副产物，利于分离纯化，在5L发酵罐中转化4h，L‑苯甘氨酸产量可达105.7g/l，转化率为93.3％，L‑苯苷氨酸的时空产率为26.3g/L·h，为L‑苯苷氨酸的工业化生产提供了一种实际有效的策略。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 合成 甘氨酸 单细胞 工厂 及其 构建 应用 | ||
【主权项】：
1.一种亮氨酸脱氢酶突变体，其特征在于，所述突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
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