[发明专利]一种同时检测α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和乳铁蛋白含量的方法

摘要

本发明公开了一种同时检测α‑乳白蛋白、β‑乳球蛋白和乳铁蛋白含量的方法，包括以下步骤：利用生物芯片点样仪在芯片载体上固定α‑乳白蛋白、β‑乳球蛋白和乳铁蛋白，再封闭载体基片上没有结合点样物的活性基团；在生物芯片的部分反应孔内加入α‑乳白蛋白、β‑乳球蛋白和乳铁蛋白的混合标准溶液，在剩余反应孔内分别加入待测样品溶液，继续向所有反应孔中依次加入α‑乳白蛋白、β‑乳球蛋白和乳铁蛋白所对应的抗体和标记二抗，反应后洗涤液洗涤；所有反应孔内加入显色剂，显色反应；反应后终点颜色的深浅可目视定性判断样品中待测物的含量，再使用仪器利用外标曲线定量计算待测物溶液中α‑乳白蛋白、β‑乳球蛋白和乳铁蛋白的含量。本发明方法可以快速准确的同时测定α‑乳白蛋白、β‑乳球蛋白和乳铁蛋白的含量，灵敏度高，检测时间短，操作简单易行。

主权项

1.一种同时检测α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和乳铁蛋白含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和乳铁蛋白标准品在载体片基内进行点样操作，然后固定、封闭、洗涤；(2)在经由步骤(1)处理后的部分反应孔内加入不同浓度梯度的α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和乳铁蛋白标准品混合溶液和相应的混合抗体，在剩余反应孔内加入待测样品溶液和α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和乳铁蛋白混合抗体，然后所有反应孔反应并洗涤；(3)在经由步骤(2)处理后的每个反应孔内加入纳米材料或者生物酶标记二抗，继续反应并洗涤；(4)在经由步骤(3)处理后的每个反应孔内加入显色剂，避光反应；(5)用芯片扫描仪对步骤(4)反应后的载体片基进行图像扫描，根据不同浓度的灰度值信号，利用外标曲线法定量检测待测样品中α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和乳铁蛋白的含量。