[发明专利]鉴定单增李斯特菌1/2c血清型的NASBA检测方法

摘要

本发明公开了一种鉴定单增李斯特菌1/2c血清型的NASBA检测引物及方法，属于生物技术领域。正向引物序列为5’‑GAAATACATTTTGGTC TAG‑3’，反向引物序列为5’‑aattctaatac gactcactatagggATTACTGGGAATAACTTGA‑3’，单增李斯特菌1/2c血清型检测用分子信标探针序列为5’‑JOE‑CGATCGAGGAAATGCTTATGCAGATA TTACGATCG‑DABCYL‑3’，检测方法包括下列步骤：单增李斯特菌RNA提取，实时NASBA反应，定性分析。本发明构建的引物和分子信标对单增李斯特菌1/2c血清型菌株的鉴定具有高度的特异性和灵敏度，所述的检测方法操作步骤简单，检测时间短，可进行实时定性分析，并且可对活菌和死菌有效区分。

主权项

一种鉴定单增李斯特菌1/2c血清型的NASBA检测方法，其特征在于,所述NASBA检测方法特异性引物序列如下：正向引物NM2c‑F序列为5’‑GAAATACATTTTGGTCTAG‑3’，反向引物NM2c‑R序列为5’‑aattctaatacgactcactatagggATTACTGGGAATAACTTGA‑3’；所述NASBA检测方法用分子信标探针MB2c，其序列为5’‑JOE‑CGATCGAGGAAATGCTTATGCAGATATTACGATCG‑DABCYL‑3’，所述的分子信标探针在5’端标记荧光报告集团JOE，3’端标记荧光淬灭集团DABCYL。