[发明专利]一种高纯度D‑阿洛酮糖的制备方法在审
申请号: | 201711106927.3 | 申请日: | 2017-11-10 |
公开(公告)号: | CN107699557A | 公开(公告)日: | 2018-02-16 |
发明(设计)人: | 李方华;窦光朋;邵先豹;刘杰;刘双双;杜倩;张明站 | 申请(专利权)人: | 山东百龙创园生物科技股份有限公司 |
主分类号: | C12N9/90 | 分类号: | C12N9/90;C12P19/24;C12P19/02;C12R1/125 |
代理公司: | 济南金迪知识产权代理有限公司37219 | 代理人: | 朱家富 |
地址: | 251200 山东省*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明涉及一种高纯度D‑阿洛酮糖的制备方法,包括如下步骤(a)制备D‑阿洛酮糖差向异构酶粗酶制剂;(b)步骤(a)中粗酶制剂与葡萄糖异构酶进行固定化;(c)制备含有D‑阿洛酮糖、果糖、葡萄糖的混合液;(d)将步骤(c)制得的混合液经脱色、过滤、离交得到D‑阿洛酮糖溶液和果糖、葡萄糖的混合液;(e)步骤(d)制得的D‑阿洛酮糖溶液经过色谱分离、浓缩、结晶或干燥,制得D‑阿洛酮糖。 | ||
搜索关键词: | 一种 纯度 阿洛酮糖 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种高纯度D‑阿洛酮糖的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:(a)枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BLCY‑005经发酵培养基发酵培养,制得发酵液,发酵液经离心分离,洗涤菌体,二次离心,保留沉淀物,制得D‑阿洛酮糖差向异构酶粗酶制剂;所述发酵培养基,组分如下,均为质量百分比:玉米浆粉3~8%,葡萄糖0.8~1.5%,萘乙酸0.08~0.12%,七水硫酸镁0.015~0.025%,磷酸氢二铵0.01~0.02%,硫酸锰0.015~0.02%,硫酸铜0.015~0.018%,氯化铁0.08~0.12%,余量水,pH6.8~7.2;(b)步骤(a)中粗酶制剂与葡萄糖异构酶以1:(1~5)(质量比)的比例混合均匀,然后按质量比20%~60%的比例加入到质量浓度为1%~3%的海藻酸钠溶液中,混合均匀,然后滴加到质量浓度为1%~3%的氯化钙溶液中,4℃固定12~36小时;(c)配制质量浓度为20%~80%的葡萄糖溶液,按质量百分比0.0001%~0.0005%的比例添加氯化钴,混合均匀,缓慢通过添加固定化酶的柱子,得到含有D‑阿洛酮糖、果糖、葡萄糖的混合液;(d)收集步骤(c)制得的混合液,经脱色、过滤、离交得到D‑阿洛酮糖溶液和果糖、葡萄糖的混合液;(e)步骤(d)制得的D‑阿洛酮糖溶液经过色谱分离、浓缩、结晶或干燥,制得D‑阿洛酮糖。
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