[发明专利]CRISPR/CAS9介导药物转运体靶向性敲除的caco‑2细胞模型及其方法在审
| 申请号： | 201710911586.0 | 申请日： | 2017-09-29 |
| 公开（公告）号： | CN107760652A | 公开（公告）日： | 2018-03-06 |
| 发明（设计）人： | 黄黎珍;钟国瑞;谢水林;庞土慧;姜二岗;邹淑香;李浩健;戴仁科 | 申请（专利权）人： | 华南理工大学 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/85 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司44102 | 代理人： | 何淑珍 |
| 地址： | 510006 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了CRISPR/CAS9介导药物转运体靶向性敲除的caco‑2细胞模型及其方法，该方法用于非诊断或治疗目的，包括如下步骤对P‑gp、BCRP及MRP2转运体设计靶点特异性的sgRNA，设计的sgRNA序列如序列表中SEQ ID NO1‑6所示，构建sgRNA表达载体；利用CRISPR/CAS9分别设计P‑gp、BCRP及MRP基因单敲除及两两组合双敲除，与hCas9质粒共转染caco‑2细胞，进行单克隆化扩大培养，即得转运体基因靶向性的caco‑2细胞模型。本发明获得的caco‑2细胞模型将有效排除不同转运体之间相互干扰，为药物转运研究提供更特异、更灵敏的细胞模型。 | ||
| 搜索关键词： | crispr cas9 药物 转运 靶向 caco 细胞 模型 及其 方法 | ||
【主权项】：
CRISPR/CAS9介导药物转运体靶向性敲除caco‑2细胞模型的方法，其特征在于，包括如下步骤：1）对P‑gp、BCRP及MRP2转运体设计靶点特异性的sgRNA，设计的sgRNA的序列如序列表中SEQ ID NO：1‑ SEQ ID NO：6所示，再构建sgRNA表达载体；2）利用CRISPR/CAS9分别设计P‑gp、BCRP及MRP基因单敲除及两两组合双敲除，与hCas9质粒共转染caco‑2细胞，进行单克隆化扩大培养，即得转运体基因靶向性的caco‑2细胞模型。
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