[发明专利]一种由表皮干细胞诱导分化汗腺细胞的方法及其培养基组有效
申请号: | 201710909244.5 | 申请日: | 2017-09-29 |
公开(公告)号: | CN107828716B | 公开(公告)日: | 2020-09-25 |
发明(设计)人: | 黄燕飞;车七石;刘少辉 | 申请(专利权)人: | 广州润虹医药科技股份有限公司 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071 |
代理公司: | 广州市越秀区哲力专利商标事务所(普通合伙) 44288 | 代理人: | 李天星;彭成 |
地址: | 510000 广东省广州市广州经济*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种由表皮干细胞诱导分化汗腺细胞的方法,包括以下步骤:1)从离体皮肤组织中分离表皮干细胞,在表皮干细胞培养基进行传代培养;2)将步骤1)得到的表皮干细胞进行传代培养、加入汗腺细胞诱导培养基进行诱导分化;和3)利用汗腺细胞培养基进行传代与增殖。本发明同时提供了相对应的培养基组。该方法细胞源有效地避免了伦理学争议,该制备方法有助于制得细胞定向分化、增殖情况较均一的汗腺细胞。 | ||
搜索关键词: | 一种 表皮 干细胞 诱导 分化 汗腺 细胞 方法 及其 培养基 | ||
【主权项】:
一种由表皮干细胞诱导分化汗腺细胞的方法,包括以下步骤:1)从离体皮肤组织中分离表皮干细胞,在表皮干细胞培养基进行传代培养;所述表皮干细胞培养基为含有氢化可的松、胰岛素、腺嘌呤、青霉素、人表皮生长因子、转铁蛋白、谷氨酸、Y‑27632和羧甲基壳聚糖的DMEM培养基;2)将步骤1)得到的表皮干细胞进行传代培养,待其融合度达到80%时,弃去培养基,用DMEM/F12清洗,加入汗腺细胞诱导培养基进行诱导分化;所述汗腺细胞诱导培养为含有人表皮生长因子、霍乱毒素、三碘甲状腺原氨酸和氯化乙酰胆碱的DMEM培养基;3)培养若干天后,待培养基内出现多边形、铺路石样的细胞,即为汗腺细胞,将培养基换成汗腺细胞培养基,培养若干天后,进行传代与增殖;所述汗腺细胞培养基为含有EGF、牛垂体提取物、青霉素和链霉素的DMEM培养基。
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