[发明专利]一种特立帕肽的制备方法

摘要

本发明公开了一种特立帕肽的制备方法，包括了它的合成与纯化，属于药物制备的领域。本发明通过1)在活化剂系统的存在下，由树脂固相载体和Fmoc‑Phe‑OH偶联得到Fmoc‑Phe‑树脂；2)通过固相合成法，按特立帕肽主链肽序依次偶联具有N端Fmoc保护且侧链保护的氨基酸得到全肽树脂；3)全肽树脂在32号氨基酸缩合时使用COMU作为缩合剂且每步合成过程中采用哌啶/Cl‑HOBT的DMF溶液作为脱保护剂；4)肽树脂裂解得到粗品，粗品经过初步纯化、精制及除盐等过程制得了特立帕肽，其工艺杂质中的消旋杂质D‑His32‑特立帕肽含量小于0.1％。本发明提供了一种纯度高、成本低、适合规模化生产的特立帕肽制备工艺，此工艺既有效控制了工艺杂质又明显的提高了特立帕肽的总收率。

主权项

一种特立帕肽的固相合成方法，其特征在于：所述特立帕肽的氨基酸序列为：H‑Ser‑Val‑Ser‑Glu‑Ile‑Gln‑Leu‑Met‑His‑Asn‑Leu‑Gly‑Lys‑His‑Leu‑Asn‑Ser‑Met‑Glu‑Arg‑Val‑Glu‑Trp‑Leu‑Arg‑Lys‑Lys‑Leu‑Gln‑Asp‑Val‑His‑Asn‑Phe‑OH；所述方法包括如下步骤：(1)在活化剂的存在下，树脂固相载体和Fmoc‑Phe‑OH偶联反应，得到Fmoc‑Phe‑树脂；(2)通过固相合成法，在缩合剂存下在，按特立帕肽主链肽序依次偶联具有N端Fmoc保护的氨基酸得到全肽树脂，且每偶联上一个具有N端Fmoc保护的氨基酸后，采用脱保护剂脱除Fmoc基团，再偶联下一个具有N端Fmoc保护的氨基酸；其中，在连接第32号氨基酸时，氨基酸缩合的缩合剂为COMU，其余的缩合剂为DIC/Cl‑HOBT、TBTU/HOBT/DIEA、TBTU/Cl‑HOBt/DIEA组合中的一种或多种；所述的脱保护剂为哌啶/Cl‑HOBt的DMF溶液或者哌啶的DMF溶液；(3)采用含有PhSMe/PhOH/EDT体系的裂解液裂解2小时，将肽链从肽树脂上脱下，经过初步纯化、精制即得特立帕肽。