[发明专利]一种循环肿瘤细胞的免疫荧光染色及判读方法

摘要

本发明公开了一种循环肿瘤细胞免疫荧光染色及判读方法，包括以下步骤S10对用磷酸缓冲溶液稀释后的血液样品进行离心处理后，除去血液样品中的红细胞和白细胞；S20用磷酸缓冲溶液润洗处理后的血液样品，加入固定液对血液样品中的细胞进行固定后加入透化液进行透化，再加入封闭液进行充分封闭；S30向处理后的血液样品在暗处滴加anti‑pan‑CK‑FITC、anti CD45‑AF594和anti‑Vimentin‑FITC染色液，避光孵育后弃去上述染色液加入核酸荧光染料继续孵育。所述判读方法，包括扫描观察和结果判定。与现有技术相比，本发明染色方法具有操作简便、易于推广等优点；判读方法具有判定准确等优点。

主权项

一种循环肿瘤细胞的免疫荧光染色方法，其特征在于：包括以下步骤：S10样本处理：对用磷酸缓冲溶液稀释后的血液样品进行离心处理后，除去血液样品中的红细胞和白细胞；S20染色前处理：用磷酸缓冲溶液润洗所述步骤S10处理后的血液样品，加入固定液对血液样品中的细胞进行固定后加入透化液进行透化，再加入封闭液进行充分封闭；S30免疫染色：向所述步骤S20处理后的血液样品在暗处滴加anti‑pan‑CK‑FITC染色液、anti CD45‑AF594染色液和anti‑Vimentin‑FITC染色液，避光孵育后弃去上述染色液加入核酸荧光染料继续孵育。