[发明专利]制备融合蛋白的方法

摘要

本发明提供一种制备融合蛋白的方法，所述方法包括可以使活性分子K1和活性分子K2通过连接肽相连接的步骤，所述连接肽由柔性肽和刚性肽组成；其中，所述柔性单元包含Gly和Ser；和所述刚性单元包含人绒毛膜促性腺激素β亚基的羧基末端肽，且包含至少2个糖基化位点；所述方法采用的连接肽具有广泛适用性和可移植性，刚性单元和柔性单元的组合序列，则能赋予连接肽具有介于完全刚性和完全柔性之间的构象，且可保护融合蛋白不易在连接区被降解，由该连接肽组成的融合蛋白具有显著延长的体内循环半衰期、保持较好的生物学活性，且生物利用度更高。

主权项

一种制备融合蛋白的方法，其结构通式表示为K1‑L‑K2，所述融合蛋白包含第一种生物活性分子K1、第二种生物活性分子K2和连接肽L，K1选自可溶性或者膜信号分子、细胞因子、生长因子、激素、共刺激分子、酶、受体以及对于受体具有配体功能的蛋白或者多肽，K2为延长循环半衰期的血清蛋白或蛋白结构域，且选自人血白蛋白、转铁蛋白或抗体/免疫球蛋白Fc片段，所述方法包括可以使生物活性分子K1和K2通过连接肽L相连接的步骤，其特征在于，所述连接肽L由柔性肽和刚性肽组成；所述柔性单元的氨基酸组成的结构通式为(GS)a(GGS)b(GGGS)c(GGGGS)d，其中a，b，c和d是大于或等于0的整数，且a+b+c+d≥1；和所述刚性单元包含人绒毛膜促性腺激素β亚基的羧基末端肽，且包含至少2个糖基化位点。