[发明专利]一种蛹虫草活性组分的分离纯化方法

摘要

本发明公开的是一种蛹虫草活性组分的分离纯化方法，具体包括以下步骤：将蛹虫草烘干粉碎，蛹虫草粉末用75％‑100％乙醇抽提，提取的上清液旋干得到固体，将固体用水溶解后与Oligo(dT)进行亲和，水浴加热，去除上清液，获得虫草素溶液，本发明通过酒精将蛹虫草中的核酸类物质去除，避免了后续过程中的核酸污染，通过亲和层析来分离纯化虫草素，吸附性强，特异性高，避免了有效损失，提高了有效成分的纯度，生产周期短，成本低，对设备要求低，操作简单，易于推广市场潜力大，分离纯化过程避开了有害溶剂的污染，提取物安全无毒，绿色环保。

主权项

一种蛹虫草活性组分的分离纯化方法，其特征在于，该方法采用如下步骤：步骤1)：将蛹虫草置于50‑70℃条件下烘干至蛹虫草含水量在8％以下，超微粉碎5‑15min，获得超微蛹虫草粉；步骤2)：将步骤1)获得的超微蛹虫草粉加入到浓度为75‑100％的乙醇溶液中，充分搅拌溶解，超声30‑60min，静置1‑12h，置于转速为8000‑10000rpm离心机内离心获取上清液，重复1‑2次，合并上清液；步骤3)：将步骤2)合并的上清液旋干获得固体，将固体置于烧杯中，缓慢加入蒸馏水溶解，并充分搅拌，获得浓度为0.9‑1.1mg/ml溶液，再将溶液置于转速为8000‑10000rpm离心机内离心，获得初步提取液；步骤4)：按质量份数，将400‑600份偶联了Oligo(dT)的磁珠用400‑600份水洗涤两次，加入100‑300份初步提取液，重置磁珠，置于室温条件下反应5‑10min，用磁性分离器进行磁性分离，在磁性分离器上用移液器将上清液弃去；再加入100‑300份水，混匀磁珠，用磁性分离器进行磁性分离，在磁性分离器上用移液器移取上清液弃去，重复两次；继续加入50‑200份水，混匀磁珠，置于65‑100℃水浴加热5‑30min，快速置于磁性分离架上，进行磁性分离，快速用移液器移取上清液弃去，获得虫草素溶液。