[发明专利]一种表达猪溶菌酶基因的乳酸克鲁维酵母及表达方法在审
| 申请号： | 201710467701.X | 申请日： | 2017-06-20 |
| 公开（公告）号： | CN107236681A | 公开（公告）日： | 2017-10-10 |
| 发明（设计）人： | 曹远东;汪石粮;周志;曾二生;程晓文;向勇 | 申请（专利权）人： | 江西嘉博生物工程有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/19 | 分类号： | C12N1/19;C12N15/81;C12R1/645 |
| 代理公司： | 南昌新天下专利商标代理有限公司36115 | 代理人： | 谢德珍 |
| 地址： | 332600 江西省九江*** | 国省代码： | 江西;36 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种表达猪溶菌酶基因的乳酸克鲁维酵母的表达方法首先以乳酸克鲁维酵母密码子偏好性优化并合成猪溶菌酶基因，基因两端同时引入NcoI与EcoRI两个限制性内切酶位点，使用NcoI与EcoRI同时对该基因与乳酸克鲁维酵母质粒pKLAC2进行双酶切，回收酶切产物，4℃连接过夜，转化到大肠杆菌JM109感受态细胞中，PCR扩增鉴定疑似阳性转化子并测序，同时提取疑似阳性转化子的质粒进行双酶切鉴定，从而获得阳性转化子lys‑pKLAC2‑JM109，提取重组质粒lys‑pKLAC2并使用SacII酶切线性化，线性化的重组质粒转化乳酸克鲁维酵母GG779,经PCR扩增鉴定获得重组乳酸克鲁维酵母lys‑pKLAC2‑GG779。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 表达 猪溶菌酶 基因 乳酸 克鲁 酵母 方法 | ||
【主权项】：
一种表达猪溶菌酶基因的乳酸克鲁维酵母，其特征在于，所述乳酸克鲁维酵母为GG779。
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