[发明专利]一种提高免疫组库多重PCR建库质量的方法及其应用在审
| 申请号： | 201710457933.7 | 申请日： | 2017-06-16 |
| 公开（公告）号： | CN109136346A | 公开（公告）日： | 2019-01-04 |
| 发明（设计）人： | 李红梅;董燕;马俊平;陈冬菊;吴海燕;马媛;叶明芝;朱红梅 | 申请（专利权）人： | 深圳华大基因股份有限公司;天津华大医学检验所有限公司;广州华大基因医学检验所有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/686 | 分类号： | C12Q1/686;C12N15/10;C40B50/06 |
| 代理公司： | 深圳鼎合诚知识产权代理有限公司 44281 | 代理人： | 彭家恩;罗瑶 |
| 地址： | 518083 广东省深圳市盐田*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本申请公开了一种提高免疫组库多重PCR建库质量的方法及其应用。本申请的提高免疫组库多重PCR建库质量的方法，包括以含已知比例基因片段的核酸标准品为模板；采用多重引物组进行PCR扩增、建库和测序；分析测序结果中各基因片段比例；比较分析的比例与实际比例；根据比较结果调整引物在多重引物组中的比例；采用比例调整后的多重引物组对待测样品进行建库。本申请的方法，采用多重引物组对核酸标准品进行文库构建，然后测序分析各基因片段比例，利用测序获得的比例与实际比例比较，判断引物扩增效率，据此调整各引物的用量，以调整后的多重引物组对待测样品进行文库构建，保障待测样品中各基因片段都能够得到有效扩增，提高建库质量。 | ||
| 搜索关键词： | 建库 多重引物 基因片段 免疫组库 多重PCR 测序 核酸标准品 文库构建 引物 申请 比较分析 比例调整 测序分析 待测样品 引物扩增 扩增 组对 应用 分析 | ||
【主权项】：
1.一种提高免疫组库多重PCR建库质量的方法，其特征在于：包括以核酸标准品为模板，所述核酸标准品中含有已知用量比例和类型的基因片段；采用多重引物组对核酸标准品进行PCR扩增，构建文库；利用多重PCR扩增构建的文库进行测序，分析核酸标准品中各基因片段的比例；将测序分析获得的核酸标准品中各基因片段的比例，与核酸标准品中各基因片段的实际比例进行比较；根据比较结果调整相应的引物在多重引物组中的用量比例；采用比例调整后的多重引物组对待测样品进行扩增建库。
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