[发明专利]一种葛仙米藻胆蛋白的提取、纯化方法及纯化的藻红蛋白有效
申请号: | 201710447906.1 | 申请日: | 2017-06-14 |
公开(公告)号: | CN107200774B | 公开(公告)日: | 2020-04-10 |
发明(设计)人: | 余佳;张瑞华;王玉兰;占豪;陈盛;王维 | 申请(专利权)人: | 湖南炎帝生物工程有限公司 |
主分类号: | C07K14/405 | 分类号: | C07K14/405;C07K1/36;C07K1/18;C07K1/34;C07K1/14 |
代理公司: | 上海麦其知识产权代理事务所(普通合伙) 31257 | 代理人: | 董红曼 |
地址: | 412007 湖南省株洲市*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | 本发明公开了一种葛仙米藻红蛋白的纯化方法,包括:(1)选用阴离子交换柱过柱;(2)配置PB缓冲液Buffer A和PB‑NaCl缓冲液Buffer B;(3)葛仙米藻胆蛋白粗提粉末用PB缓冲液Buffer A溶解,离心,过滤;(4)洗泵,用PB缓冲液Buffer A平衡离子交换柱;(5)将步骤(3)制备的溶解于PB缓冲液Buffer A中的葛仙米藻胆蛋白直接上样,PB‑NaCl缓冲液Buffer B梯度洗脱,收集洗脱液;(6)用盐溶液清洗离子交换柱,然后用碱溶液反向冲洗;(7)对淋洗液进行超滤浓缩,透析,得到纯化的葛仙米藻红蛋白水溶液。本发明的方法操作简单,得到的葛仙米藻红蛋白浓度和纯度都得到显著提高,适于工业化大规模生产。 | ||
搜索关键词: | 一种 葛仙米藻胆 蛋白 提取 纯化 方法 | ||
【主权项】:
一种葛仙米藻红蛋白的纯化方法,其特征在于,包括步骤:(1)选用阴离子交换柱过柱;(2)配置PB缓冲液BufferA和PB‑NaCl缓冲液Buffer B;(3)葛仙米藻胆蛋白粗提粉末用PB缓冲液BufferA溶解,离心,过滤;(4)洗泵,用PB缓冲液BufferA平衡离子交换柱;(5)将步骤(3)制备的溶解于PB缓冲液BufferA中的葛仙米藻胆蛋白直接上样,PB‑NaCl缓冲液Buffer B梯度洗脱,收集洗脱液;(6)用盐溶液清洗离子交换柱,然后用碱溶液反向冲洗;(7)对步骤(5)的洗脱液进行超滤浓缩,透析,得到纯化的葛仙米藻红蛋白水溶液;其中,PB缓冲液BufferA的pH为5~6.5;PB‑NaCl缓冲液Buffer B的pH为5~6.5。
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