[发明专利]胃膜素和胃蛋白酶的联合提取方法有效
申请号: | 201710438060.5 | 申请日: | 2017-06-12 |
公开(公告)号: | CN107299094B | 公开(公告)日: | 2020-09-29 |
发明(设计)人: | 龚征强;叶长蓉 | 申请(专利权)人: | 四川菲德力制药有限公司 |
主分类号: | C12N9/64 | 分类号: | C12N9/64;C07K14/47;C07K1/14 |
代理公司: | 成都正华专利代理事务所(普通合伙) 51229 | 代理人: | 李林合 |
地址: | 610031 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | 本发明公开了一种胃膜素和胃蛋白酶的联合提取方法。该方法包括以下步骤:(1)向猪胃黏膜中加入盐酸溶液和苯甲酸钠溶液,过滤,收集滤液:(2)向滤液中分别加入碱性脂肪酶和中性脂肪酶,酶解,浓缩酶解液;(3)向浓缩液中加入丙酮,过滤,洗涤,得胃膜素以及上清液和洗涤液的合并液;(4)向合并液中加入混合盐溶液,静置离心,得胃蛋白酶。本发明方法可有效降低生产成本,减少安全隐患,还可提升胃膜素得率和胃蛋白酶酶活。 | ||
搜索关键词: | 胃膜素 胃蛋白酶 联合 提取 方法 | ||
【主权项】:
一种胃膜素和胃蛋白酶的联合提取方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)以料液比为1:1.55~1.65的比例,向猪胃黏膜中加入体积分数为4%~6%的盐酸溶液,再加入50%~60%猪胃黏膜重量的苯甲酸钠,40~45℃浸泡1~2h,过滤,收集滤液;(2)向滤液中加入碱性脂肪酶,于32~35℃,pH值为9.0~9.2的条件下酶解0.5~1.5h,继续加入中性脂肪酶,于32~35℃,pH值为7.0的条件下酶解0.5~1.5h,再将其浓缩为原滤液体积的1/3~1/2,冷却至0~5℃;其中,碱性脂肪酶和中性脂肪酶与滤液的重量体积比均为0.02~0.05:1;(3)调节上述浓缩液pH值为3.0~6.0,再缓慢加入等体积的0~5℃ 的丙酮,并在添加过程中迅速搅拌,静置16~20h,过滤,分别收集胃膜素粗品和上清液,向胃膜素粗品中加入0~5℃的95%乙醇,洗涤2~3次,分离胃膜素和洗涤液,于70~80℃真空干燥胃膜素,得胃膜素精品;(4)将步骤(3)中所述洗涤液与上清液合并,在快速搅拌过程中,缓慢加入1.5~2倍混合液体积的混合盐溶液,调节溶液pH值为4.0~5.0,静置20~28h,离心,再用90%乙醇洗涤沉淀物2~3次,得胃蛋白酶。
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