[发明专利]一种基于依赖解旋酶DNA恒温扩增技术检测microRNA的方法有效
申请号: | 201710325050.0 | 申请日: | 2017-05-10 |
公开(公告)号: | CN107130024B | 公开(公告)日: | 2020-03-27 |
发明(设计)人: | 张春阳;马飞;刘萌 | 申请(专利权)人: | 山东师范大学 |
主分类号: | C12Q1/6844 | 分类号: | C12Q1/6844 |
代理公司: | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人: | 薛鹏喜 |
地址: | 250014 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明公开了一种基于依赖解旋酶DNA恒温扩增技术检测microRNA的方法,步骤如下:(1)提取样品中的总RNA;(2)向提取的总RNA中加入单链DNA探针和过量的核酸外切酶I,在反应缓冲液中进行孵育,实现目标microRNA与单链DNA探针的特异性结合,利用过量的核酸外切酶I将多余的单链DNA探针消除;(3)向步骤(2)的反应体系中加入上游引物、下游引物、单链结合蛋白和解旋酶,对目标microRNA进行扩增反应,通过荧光信号检测目标microRNA的表达。本发明借助核酸外切酶I的消化以降低背景、利用解旋酶辅助的恒温扩增(HDA)反应以放大信号,实现了对microRNA的快速和高灵敏检测。 | ||
搜索关键词: | 一种 基于 依赖 解旋酶 dna 恒温 扩增 技术 检测 microrna 方法 | ||
【主权项】:
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