[发明专利]变异黄嘌呤脱氢酶及其应用有效
申请号: | 201710152663.9 | 申请日: | 2017-03-15 |
公开(公告)号: | CN108624568B | 公开(公告)日: | 2021-09-14 |
发明(设计)人: | 邢新会;王成华;张翀 | 申请(专利权)人: | 清华大学 |
主分类号: | C12N9/02 | 分类号: | C12N9/02;C12N15/53;A62D3/02;A62D101/28 |
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摘要: | 本发明公开了一种变异黄嘌呤脱氢酶及其应用。本发明的变异黄嘌呤脱氢酶是将野生变异黄嘌呤脱氢酶进行如下任一突变后获得的:1)在野生变异黄嘌呤脱氢酶的α亚基的D358与E359位之间插入一段长度由QDISAVCYKLSKRFE组成的15各氨基酸多肽片段;2)将野生变异黄嘌呤脱氢酶的α亚基进行F270L突变;3)将野生变异黄嘌呤脱氢酶的α亚基进行S362A突变。本发明的变异黄嘌呤脱氢酶的黄嘌呤氧化酶活性显著增强,与野生型黄嘌呤脱氢酶相比,利用空气中氧气作为电子受体,催化氧化黄嘌呤底物的活性分别增加2125倍,63倍和122倍,可降低生产成本,更加适用于工业化生产应用。 | ||
搜索关键词: | 变异 黄嘌呤 脱氢酶 及其 应用 | ||
【主权项】:
1.一种蛋白质,由α亚基和β亚基构成,其特征在于:所述α亚基为如下(a1)‑(a4)中任一;所述β亚基为如下(b1)或(b2);(a1)氨基酸序列为序列表中序列3所示的亚基;(a2)将序列表中序列1的第270位的丙苯氨酸替换为亮氨酸后得到的氨基酸序列所示的亚基;(a3)将序列表中序列1的第362位的丝氨酸替换为丙氨酸后得到的氨基酸序列所示的亚基;(a4)将(a1)‑(a3)中任一氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的替换和/或缺失和/或添加后得到的具有相同功能的亚基;(b1)氨基酸序列为序列表中序列2所示的亚基;(b2)将(b1)的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的替换和/或缺失和/或添加后得到的具有相同功能的亚基。
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