[发明专利]一种在体内获得并纯化大量目的LncRNA的方法有效
| 申请号： | 201710040358.0 | 申请日： | 2017-01-19 |
| 公开（公告）号： | CN106591367B | 公开（公告）日： | 2019-05-07 |
| 发明（设计）人： | 肖建如;周旺;李博;陈天睿;魏海峰;王静;严望军;李佳林 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军第二军医大学 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/113 |
| 代理公司： | 上海卓阳知识产权代理事务所(普通合伙) 31262 | 代理人： | 周春洪 |
| 地址： | 200433 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种在体内获得并纯化大量目的LncRNA的方法。本发明在LncRNA基因序列3’末端设计PPR蛋白特异性识别碱基，将PPR蛋白和LncRNA过表达质粒共转染细胞，使PPR和LncRNA在细胞内大量表达，然后通过Anti‑Flag抗体富集PPR蛋白，进而间接富集LncRNA，实现了在体内成功获得并纯化大量目的LncRNA。本发明可明显简化现有技术中体外转录获得目的LncRNA的步骤，且经济简便，可行性强，便于LncRNA相关实验的研究，在LncRNA的作用机制研究领域提供了崭新的思路。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 体内 获得 纯化 大量 目的 lncrna 方法 | ||
【主权项】：
1.一种在体内获得并纯化目的LncRNA的方法，其特征在于，包括以下步骤：a)将带有标签蛋白的PPR蛋白的过表达载体与LncRNA过表达载体共转染工具细胞，所述的LncRNA过表达载体的LncRNA基因序列下游带有PPR蛋白的特异性识别碱基序列；b)培养工具细胞；c)裂解工具细胞，富集和纯化PPR蛋白，进而间接地富集和纯化得到LncRNA。
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