[发明专利]微量基因组DNA的探针连接扩增检测方法在审
申请号: | 201710027293.6 | 申请日: | 2017-01-13 |
公开(公告)号: | CN106834452A | 公开(公告)日: | 2017-06-13 |
发明(设计)人: | 姜正文;陈小燕;刘超 | 申请(专利权)人: | 天昊生物医药科技(苏州)有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/10 |
代理公司: | 上海申新律师事务所31272 | 代理人: | 翁德亿 |
地址: | 215000 江苏省苏州市工业园*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种微量基因组DNA的探针连接扩增检测方法,包括以下步骤微量基因组DNA样本进行浓缩或蒸干呈粉末状;以浓缩或蒸干的基因组DNA为模板进行连接反应,连接体系的体积不高于20μL,模板DNA量不高于50ng;微量连接反应体系采取防挥发措施,缩小反应体系与空气的接触面积;以连接反应的产物为模板进行多重PCR扩增;得到扩增产物。本发明模板需求量少在本发明的微量连接体系中,DNA模板的总量低于50ng也可达到常规连接体系的连接效果;特异性和稳定性高,DNA模板总量低于50ng也可达到常规连接体系的连接特异性和稳定性;试剂损耗小本发明的微量连接体系相对常规体系体积减少较多,因此各个成分的试剂损耗也相对减少,节约了试剂成本。 | ||
搜索关键词: | 微量 基因组 dna 探针 连接 扩增 检测 方法 | ||
【主权项】:
一种微量基因组DNA的探针连接扩增检测方法,其特征在于,包括以下步骤:1)微量基因组DNA样本进行浓缩或蒸干呈粉末状;2)以浓缩或蒸干的基因组DNA为模板进行连接反应,连接体系的体积不高于20μL,模板DNA量不高于50ng;3)微量连接体系采取防挥发措施,减少反应体系与空气的接触面积,比如在液面覆盖有机试剂、采用末端封闭的毛细管进行连接反应等。4)以连接反应的产物为模板进行多重PCR扩增;5)得到扩增产物。
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