[发明专利]一种利用环糊精葡萄糖基转移酶转糖基反应提高染料木素水溶性的方法在审
| 申请号： | 201710014828.6 | 申请日： | 2017-01-09 |
| 公开（公告）号： | CN106754604A | 公开（公告）日： | 2017-05-31 |
| 发明（设计）人： | 韩瑞枝;倪晔;姜明杨;葛彬彬;许国超;董晋军 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N9/10;C12P19/18;C12P19/44;C12R1/19 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 214122 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种利用环糊精葡萄糖基转移酶转糖基反应提高染料木素水溶性的方法，属于酶工程领域。本发明将来源于P.macerans strain JFB05‑01(CCTCC NOM208063)的环糊精葡萄糖基转移酶密码子优化后的基因(GenBank accession no.JX412224)连接至pET20b(+)质粒上，并转入E.coli BL21(DE3)细胞中构建产环糊精葡萄糖基转移酶的基因工程菌。通过发酵产酶并纯化后，获得较纯的环糊精葡萄糖基转移酶用于催化转糖基反应，并以α‑环糊精作为糖基供体，染料木素作为糖基受体，最终获得至少四种染料木素糖基化衍生物(Glc)n‑genistein(n＝1,2,3,4)。其中Glc‑genistein和(Glc)2‑genistein为主要产物，特别是(Glc)2‑genistein，其水溶性较染料木素有较大幅度提高。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 利用 环糊精 葡萄 糖基转移酶 转糖基 反应 提高 染料 水溶性 方法 | ||
【主权项】：
一种产环糊精糖基转移酶的基因工程菌，其特征在于：1)采用化学全合成或PCR方法克隆GenBank accession no.JX412224所示的co‑α‑CGTase基因序列；2)将步骤1)获得的环糊精葡萄糖基转移酶基因连接至大肠杆菌表达载体pET20b(+)，得到重组表达载体；3)将步骤2)获得的重组表达载体转化至大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)得到基因工程菌。
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