[发明专利]利用木糖诱导产生四氢嘧啶的基因工程菌及其应用有效
| 申请号： | 201710012845.6 | 申请日： | 2017-01-09 |
| 公开（公告）号： | CN106754603B | 公开（公告）日： | 2019-03-05 |
| 发明（设计）人： | 谢希贤;吴雪娇;陈宁;鄢芳清;马倩;麻杰;张红超 | 申请（专利权）人： | 天津科技大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12P17/12;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京瑞盛铭杰知识产权代理事务所(普通合伙) 11617 | 代理人： | 栗华楠 |
| 地址： | 300222 天*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及一种利用木糖诱导产生四氢嘧啶的基因工程菌及其构建方法与应用。所述菌株是在大肠杆菌染色体上异源表达来自伸长盐单胞菌中的ectABC基因簇，重构四氢嘧啶合成通路，构建无质粒系统，利用木糖启动子诱导来源于T7噬菌体的RNA聚合酶，同时结合T7强启动子系统启动目的基因高效表达，从而达到摇瓶发酵20‑28h后四氢嘧啶的产量达到了12‑16g/L，5L发酵罐发酵24‑40h后四氢嘧啶的产量达到了35‑50g/L的效果。 | ||
| 搜索关键词： | 利用 诱导 产生 嘧啶 基因工程 及其 应用 | ||
【主权项】：
1.一株生产四氢嘧啶的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌以E. coli W3110，编号ATCC 27325为宿主细胞，其仅包含如下改造：T7启动子控制的来自伸长盐单胞菌的ectABC基因；thrA、iclR 两个基因缺陷型；T7启动子控制的来自谷氨酸棒状杆菌的lysC基因；trc启动子控制的ppc基因；木糖启动子PxylF控制的来源于T7 噬菌体的RNA聚合酶；所述ectABC基因的核苷酸序列为序列表SEQ ID No.1所示;所述lysC基因的核苷酸序列为序列表SEQ ID No.2所示;所述thrA基因的核苷酸序列为序列表SEQ ID No.3所示;所述iclR基因的核苷酸序列为序列表SEQ ID No.4所示;所述ppc基因的核苷酸序列为序列表SEQ ID No.8所示。
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