[发明专利]一种夹心型乙型肝炎病毒标志物免疫传感器的构建方法及应用

摘要

本发明属于新型纳米复合材料、免疫分析和生物传感技术领域，本发明涉及一种夹心型乙型肝炎病毒标志物免疫传感器的构建方法及应用，基于吸附硫瑾的铂纳米线@SBA‑15微球复合材料构建的电化学免疫传感器，用于定量检测乙型肝炎病毒标志物，具有特异性强，灵敏度高，检测限低的优点，对乙型肝炎病毒感染的早期诊断具有重要的科学意义和应用价值。

主权项

1.一种夹心型乙型肝炎病毒标志物免疫传感器的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将直径为3.0 ~ 5.0 mm的玻碳电极用Al2O3抛光粉抛光成镜面，在无水乙醇中超声清洗干净；（2）利用计时电流法，在‑0.2 V下，将抛光好的玻碳电极置于5.0 mL、1.0 wt% ~ 2.0 wt%的氯金酸溶液中，电镀25 ~ 35 s，在电极表面形成电沉积金薄膜，用超纯水冲洗电极表面，室温下晾干；（3）将上述电极表面浸入30 mL、1.0 mmol/L的4‑氨基苯硫酚溶液，浸泡2.0 h，超纯水冲洗，室温下晾干；（4）继续将电极浸入50 mL、0.04 ~ 0.05 mg/mL的金纳米粒子分散液，浸泡2.0 h，超纯水冲洗，室温下晾干；（5）将6.0 µL、5.0 ~ 10.0 µg/mL的乙型肝炎病毒标志物捕获抗体Ab1滴加到电极表面，4.0 °C冰箱中干燥；（6）继续将3.0 µL、0.5 wt% ~ 1.0 wt%的牛血清蛋白溶液滴加到电极表面，用以封闭电极表面上非特异性活性位点，pH=7.0磷酸盐缓冲液冲洗电极表面，4.0 °C冰箱中晾干；（7）继续滴加6.0 µL、0.00001 ~ 100 ng/mL的一系列不同浓度的乙型肝炎病毒标志物抗原溶液，4 °C冰箱中干燥；（8）将6.0 µL、1.0 ~ 3.0 mg/mL的吸附硫瑾的铂纳米线@SBA‑15微球/检测抗体Ab2孵化物分散液滴涂于电极表面，置于4.0 °C冰箱中，静置40 min，用pH=7.0的磷酸盐缓冲液冲洗，4.0 °C冰箱中干燥，制得一种夹心型乙型肝炎病毒标志物免疫传感器。