[发明专利]一种β-内酰胺类抗生素敏感性的快速检测方法有效
| 申请号： | 201611185195.7 | 申请日： | 2016-12-20 |
| 公开（公告）号： | CN106404831B | 公开（公告）日： | 2020-01-14 |
| 发明（设计）人： | 和媛;杨科武;王文静;王倩;雷金娥 | 申请（专利权）人： | 西北大学 |
| 主分类号： | G01N25/20 | 分类号： | G01N25/20 |
| 代理公司： | 61202 西安西达专利代理有限责任公司 | 代理人： | 谢钢 |
| 地址： | 710069 *** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于等温滴定微量热技术快速检测β‑内酰胺酶耐药特征的实验方法。该方法通过实时观察样品与抗生素混合后是否产生热量变化从而快速获得样品对药物的敏感信息。该方法不仅适用于蛋白样品，也适用于活细胞检测，因此可以应用于临床实验室进行快速耐药分析，指导医生尽早确定临床用药方案。另一方面，其应用对于及时监测耐药细菌，预防其传播和交叉感染也具有重要指导意义。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 内酰胺 抗生素 敏感性 快速 检测 方法 | ||
【主权项】：
1.一种β-内酰胺类抗生素敏感性的快速检测方法，其特征在于：将待测样品与β-内酰胺类抗生素在等温滴定微量热仪反应池中混合，记录实时热量变化，通过是否产生负的热量变化判断样品对药物的敏感信息，若放出热量，则待测样品含有β-内酰胺酶，具体包括以下步骤：/n（1）给等温滴定微量热仪样品池加待测样品，待测样品浓度为纯化蛋白质0.5-50 nM或细菌悬液 OD600 = 1~20;/n（2）滴定针加样β-内酰胺类抗生素药物，抗生素浓度 1-5 mM，缓冲液含50 mM Tris，pH7.0；/n（3）将滴定针中β-内酰胺类抗生素药物加入样品池，实时记录样品池中热量变化；反应条件：滴定体积 20-40μL，spacing time = 400s，滴定针转速750 rpm, 反应温度25 ºC；/n所述待测样品为纯化的蛋白质、细菌裂解液或临床细菌，所述临床细菌为大肠杆菌、鲍曼不动杆菌、绿脓杆菌、肺炎克雷伯菌、屎肠球菌或金黄色葡萄球菌；/n所述β-内酰胺类抗生素为青霉素类、头孢菌素类、碳青霉烯类或单环β-内酰胺类。/n
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