[发明专利]启动子文库及其构建方法

摘要

本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种启动子文库及其构建方法。本发明以酿酒酵母V号染色体为参考序列，批量设计引物PCR扩增启动子片段，基于IIS型限制性核酸内切酶及环形聚合酶延伸法进行连接组装，构建表征载体，转化酿酒酵母形成基本包含全染色体启动子的启动子文库，培养重组菌株以绿色荧光强度表征启动子调控状态。本发明通过联合多种组装策略实现重组表征载体的无痕构建，并对染色体尺度上启动子整体表征，可以快速系统地筛选得到实验条件下各种不同强度的启动子，此方法有利于启动子的研究、挖掘及应用。