[发明专利]一种KAP13-1基因在绵羊毛纤维细度鉴定中的应用有效
| 申请号： | 201611018055.0 | 申请日： | 2016-11-18 |
| 公开（公告）号： | CN106699882B | 公开（公告）日： | 2019-11-15 |
| 发明（设计）人： | 余梅;杨万宝;肖玉净;李新云;李小平;曹建华;赵书红 | 申请（专利权）人： | 华中农业大学 |
| 主分类号： | C07K16/18 | 分类号： | C07K16/18;C12N15/10;G01N33/68 |
| 代理公司： | 42001 武汉宇晨专利事务所 | 代理人： | 张红兵<国际申请>=<国际公布>=<进入 |
| 地址： | 430070湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种KAP13‐1基因在绵羊毛纤维细度鉴定中的应用。根据牛KAP13‐1基因设计引物，以绵羊皮肤cDNA为模板，RT‐PCR绵羊KAP13‐1基因片段；根据绵羊KAP13‐1基因的氨基酸序列制备多克隆抗体，用免疫组化检测KAP13‐1基因在绵羊毛囊中表达量；(3)利用2A肽序列构建绵羊启动子驱动的共表达绵羊KAP13‐1和绿荧光蛋白的重组载体；以KAP13‐1基因和ZsGreen1‐1载体中绿荧光蛋白基因设计引物；融合PCR得到KAP13‐1‐2A‐ZSG，用连接酶将KAP13‐1‐2A‐ZSG连接到双酶切载体中；以绵羊脾脏基因组为模板扩增KAP11‐1基因启动子，酶切连接到中间载体中获重组载体(4)用重组载体转化昆明小鼠，鉴定转基因阳性小鼠毛纤维皮质部中的表达量，并检测距离毛囊底部130μm处毛纤维的直径。 | ||
| 搜索关键词： | 绵羊 重组载体 基因 基因设计引物 绿荧光蛋白 表达量 毛纤维 免疫组化检测 氨基酸序列 多克隆抗体 基因启动子 绵羊毛纤维 基因片段 检测距离 昆明小鼠 绵羊皮肤 阳性小鼠 中间载体 皮质 共表达 基因组 连接酶 启动子 双酶切 转基因 肽序列 脾脏 构建 扩增 毛囊 酶切 细度 制备 驱动 融合 转化 应用 | ||
【主权项】：
1.过表达KAP13-1基因在绵羊毛纤维细度改良中的应用，其特征在于：构建核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示的重组质粒载体pKAP11-1-KAP13-1-2A-ZSG，在毛纤维皮质部特异地过表达KAP13-1基因，使毛纤维直径显著降低。/n
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