[发明专利]一种脂肪酶的固定化方法有效
| 申请号： | 201611000207.4 | 申请日： | 2016-11-14 |
| 公开（公告）号： | CN106636053B | 公开（公告）日： | 2019-08-13 |
| 发明（设计）人： | 林朝阳;沈志成 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C12N11/10 | 分类号： | C12N11/10 |
| 代理公司： | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人： | 黄美娟;李世玉 |
| 地址： | 310027 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种脂肪酶的固定化方法，所述方法为：将脂肪酶、蛋白连接肽和壳聚糖结合域氨基酸序列依次连接成脂肪酶融合蛋白，以壳聚糖为载体，将脂肪酶融合蛋白进行固定化，得到固定化脂肪酶；本发明固定化脂肪酶经过十五次的回收利用固定化脂肪酶融合蛋白催化的棕榈酸十六酯的转化率仍能保持在90％；本发明方法可以规模化生产，可以提高脂肪酶生产量，降低生产成本。 | ||
| 搜索关键词： | 脂肪酶 固定化脂肪酶 融合蛋白 固定化 壳聚糖 棕榈酸十六酯 氨基酸序列 规模化生产 蛋白连接 回收利用 依次连接 结合域 催化 | ||
【主权项】：
1.一种脂肪酶的固定化方法，其特征在于所述方法为：将脂肪酶、蛋白连接肽和壳聚糖结合域氨基酸序列依次连接成脂肪酶融合蛋白，通过农杆菌侵染法将脂肪酶融合蛋白转化水稻，获得含有脂肪酶融合蛋白基因的转基因水稻种子，将水稻种子提纯，获得脂肪酶融合蛋白溶液；将壳聚糖加入体积浓度1％的乙酸水溶液中，充分溶解，形成胶状液；将胶状液滴加到1mol/L的NaOH水溶液中，形成球形颗粒，水洗至中性，干燥后作为固体载体；然后将固体载体加入脂肪酶融合蛋白溶液中，28℃静置2h，用去离子水淋洗干净，室温干燥，得到固定化脂肪酶；所述脂肪酶氨基酸序列为SEQ ID NO.1所示，所述蛋白连接肽的氨基酸序列为SEQ ID NO.2所示，所述壳聚糖结合域氨基酸序列为SEQ ID NO.3所示。
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