[发明专利]一种诱导骨髓间充质干细胞分化成神经细胞的方法在审

专利信息
申请号: 201610931759.0 申请日: 2016-10-25
公开(公告)号: CN106434560A 公开(公告)日: 2017-02-22
发明(设计)人: 汪铮;吴振化 申请(专利权)人: 浙江译美生物科技有限公司
主分类号: C12N5/079 分类号: C12N5/079
代理公司: 北京维正专利代理有限公司11508 代理人: 林乐飞
地址: 310020 浙江省杭州*** 国省代码: 浙江;33
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摘要: 发明公开了一种诱导骨髓间充质干细胞分化成神经细胞的方法,包括以下步骤:1.骨髓间充质干细胞的制备;2.将制备得到的骨髓间充质干细胞接种至基础培养基中进行培养,待细胞生长汇合度达到60%‑80%,PBS清洗;3.加入0.25%胰蛋白酶消化3‑5min后,加入诱导培养基终止消化,轻轻吹打悬浮细胞,再将骨髓间充质干细胞移入离心管中,1500转离心5min,去除诱导培养基;4.在细胞培养器中加入诱导培养基后,按细胞密度5×103cells/cm2接种细胞,将培养器置于37℃,6%CO2的无菌培养箱中培养,每隔2‑3天换一次诱导培养基;所述诱导培养基由基础培养基添加维A酸、2‑巯基乙醇与叶酸后制得,该方法能有效缩短间充质干细胞分化成神经细胞的时间,提高诱导分化效率。
搜索关键词: 一种 诱导 骨髓 间充质 干细胞 化成 神经细胞 方法
【主权项】:
一种诱导骨髓间充质干细胞分化成神经细胞的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)骨髓间充质干细胞的制备;(2)将制备得到的骨髓间充质干细胞接种至基础培养基中进行培养,待细胞生长汇合度达到60%‑80%,吸去基础培养基后加入PBS缓冲液,轻轻清洗单层细胞,再吸去PBS;(3)加入0.25%胰蛋白酶消化3‑5min后,加入诱导培养基终止消化,轻轻吹打悬浮细胞,再将骨髓间充质干细胞移入离心管中,1500转离心5min,去除诱导培养基;(4)在细胞培养器中加入诱导培养基后,按细胞密度5×103cells/cm2接种细胞,将培养器置于37℃,6%CO2的无菌培养箱中培养,每隔2‑3天换一次诱导培养基;所述诱导培养基由基础培养基添加维A酸、2‑巯基乙醇与叶酸后制得。
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