[发明专利]热稳定性提高的酸性普鲁兰酶突变体及其编码基因和应用有效

专利信息
申请号: 201610822099.2 申请日: 2016-09-13
公开(公告)号: CN106801046B 公开(公告)日: 2020-09-15
发明(设计)人: 初晓宇;伍宁丰;田健;吕金芝;常美会;刘晓青 申请(专利权)人: 中国农业科学院生物技术研究所
主分类号: C12N9/44 分类号: C12N9/44;C12N15/56
代理公司: 北京思元知识产权代理事务所(普通合伙) 11598 代理人: 霍雪梅;余光军
地址: 100081 北*** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明公开了一种热稳定性提高的酸性普鲁兰酶突变体及其编码基因和应用。本发明选择野生型酸性普鲁兰酶的6个位点进行定点突变,从中筛选出3个热稳定性提高的单点突变体。本发明进一步在单点突变的基础上进行组合突变,获得热稳定性和催化效率提高的普鲁兰酶组合突变体,其中组合突变体PulB‑D328H/N387D/A414P的Tm比突变前提高了4.91℃,在65℃下处理10min后,其残余酶活是突变前的12.4倍。本发明进一步公开了含有所述酸性普鲁兰酶突变体编码基因的重组表达载体和重组宿主细胞。本发明所述酸性普鲁兰酶突变体的热稳定性和催化效率明显提高,在食品、化工或纺织等领域具有更好的应用前景。
搜索关键词: 热稳定性 提高 酸性 普鲁兰酶 突变体 及其 编码 基因 应用
【主权项】:
一种热稳定性提高的酸性普鲁兰酶突变体,其特征在于,所述突变体选自(a)、(b)、(c)、(d)或(e):(a)、将野生型酸性普鲁兰酶的第328位的天冬氨酸突变为组氨酸获得的突变体;或(b)、将野生型酸性普鲁兰酶的第387位的天冬酰胺突变为天冬氨酸获得的突变体;或(c)、将野生型酸性普鲁兰酶的第414位的丙氨酸突变为脯氨酸获得的突变体;或(d)、将野生型酸性普鲁兰酶的第328位的天冬氨酸突变为组氨酸,且第387位的天冬酰胺突变为天冬氨酸获得的突变体;或(e)、将野生型酸性普鲁兰酶的第328位的天冬氨酸突变为组氨酸,第387位的天冬酰胺突变为天冬氨酸,且第414位的丙氨酸突变为脯氨酸获得的突变体。
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