[发明专利]一种透明质酸发酵液提取方法

摘要

本发明属于微生物多糖生产技术领域，公开了一种透明质酸发酵液提取方法，其包括如下步骤：步骤1）透明质酸滤液A，步骤2）脱色、除杂以及沉淀，步骤3）溶解以及络合，步骤4）解离以及过滤，步骤5）沉淀、脱水以及干燥。本发明提取方法具有提取收率高，产品纯度高，对环境污染小等优点。

主权项

1.一种透明质酸发酵液提取方法，所述提取方法包括如下步骤：步骤1）透明质酸滤液A：透明质酸发酵结束后，先将透明质酸发酵液用三氯乙酸调节pH为4.0‑6.5，然后经微滤、超滤，得到透明质酸滤液A；步骤2）将步骤1）所得透明质酸滤液A经活性炭脱色、改性纤维素除杂，过滤收集透明质酸滤液B，然后调节透明质酸滤液B的pH为6.0‑6.5，再加1‑4倍体积的95%乙醇，沉淀出透明质酸粗提物；所述活性炭用量为5‑8g/L，脱色温度为60‑80℃，脱色时间为30‑60min；所述改性纤维素按照如下工艺制备而得：将纤维素和纳米硅藻土添加到1M的氢氧化钠溶液中，200转/min搅拌15min，然后进行抽滤，烘干即得；所述改性纤维素用量为3‑5g/L，温度为50‑60℃，除杂时间为10‑20min；步骤3）用与步骤1）透明质酸发酵液相同体积的0.1mol/L醋酸钠水溶液溶解透明质酸粗提物，在搅拌条件下，加入占步骤2）透明质酸滤液B 1%的壳聚糖与透明质酸发生络合沉淀，静置使沉淀下沉；步骤4）解离以及过滤：滤出母液，再加入0.1mol/L醋酸钠溶液洗涤沉淀两次，然后将沉淀在与步骤1）透明质酸发酵液相同体积的0.4mol/L醋酸钠溶液中搅拌解离20‑24小时，过滤收集滤液；步骤5）沉淀、脱水以及干燥：往步骤4）的滤液中添加2‑4倍滤液体积的95%乙醇用于沉淀透明质酸，然后用无水乙醇脱水，真空干燥得透明质酸成品；干燥温度为40‑60℃，干燥2‑4小时。