[发明专利]大肠埃希氏菌JLTrp发酵生产L-色氨酸的方法

摘要

本发明涉及大肠埃希氏菌JLTrp发酵生产L‑色氨酸的方法，包括以下步骤：（1）、培养成熟的大肠埃希氏菌JLTrp菌种；（2）、发酵罐培养：将成熟菌种接种至发酵罐内，在培养温度35‑37℃，pH采用补充液氨分段控制，压力0.082‑0.085MPa，风量0.3VVM‑2.3VVM，培养过程通过不断添加发酵培养基控制培养基中葡萄糖的质量浓度为0.01‑0.5%的条件下培养制取L‑色氨酸；本发明方法采用大肠埃希氏菌JLTrp作为菌种，在生产过程中不需要添加抗生素的即可生产L‑色氨酸，产品中无抗生素残留，且发酵周期缩短，产L‑色氨酸水平提高到70‑80g/L。

主权项

1.大肠埃希氏菌JLTrp发酵生产L‑色氨酸的方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）、种子培养：采用不添加抗生素的液体种子培养基对菌种进行扩大培养，得到培养成熟的种子液；所述菌种为大肠埃希氏菌JLTrp，其对青霉素、苯唑西林、万古霉素、克拉霉素、阿奇霉素、红霉素、克林霉素和利福平具有抗性，分类命名为大肠埃希氏菌（Escherichia coli）JLTrp，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC），菌种保藏编号为CGMCC NO. 7.217，保藏日期为2016年5月8日；所述液体种子培养基中各成分及其质量百分比含量为：葡萄糖1.5‑5.8%、酵母粉0.06‑0.28%、(NH₄)₂HPO₄ 0.82‑0.92%、KCl 0.055‑0.28%、MgSO₄ 0.075‑0.42%、(NH₄)₂SO₄ 0.06‑0.24%、柠檬酸0.08‑0.42%、 FeSO₄ 0.00014‑0.00042%、MnSO₄ 0.000065‑0.00032%、维生素B1 0.000065‑0.00039%和生物素0.000013‑0.000135%，其余为水；（2）、发酵培养：将培养成熟的种子液接种到不添加抗生素的液体发酵培养基中进行发酵培养得到发酵液，从发酵液中提取得到L‑色氨酸；发酵培养的条件为培养温度35‑37℃，pH采用补充液氨分段控制，0‑18h 7.0‑7.2，18h‑放罐时6.5‑6.7，溶氧分段控制，0‑18h 12‑24%，18h‑放罐时15‑40%，压力0.082‑0.085MPa，风量0.3VVM‑2.3VVM，培养过程通过不断添加发酵培养基控制培养基中葡萄糖的质量浓度为0.01‑0.5%；所述液体发酵培养基中各成分及其质量百分比含量为：葡萄糖1.3%、酵母粉0.16%、(NH₄)₂HPO₄ 0.15‑0.7%、KCL 0.13‑0.7%、MgSO₄ 0.06‑0.45%、(NH₄)₂SO₄ 0.09‑0.43%、柠檬酸0.05‑0.5%、 FeSO₄ 0.0015‑0.098%、Na₂SO₄ 0.00051‑0.0059%、MnSO₄ 0.00015‑0.0009%、CuSO₄ 0.00002‑0.00018%、CoCl₂ 0.00014‑0.00135%和ZnSO₄ 0.00019‑0.0020%，其余为水。